NALP3在大鼠腎缺血再灌注損傷中的表達(dá)及作用研究.pdf

1、目的：通過大鼠腎臟組織局部轉(zhuǎn)染NALP3特異性小干擾質(zhì)粒(sRNA)后制作腎臟缺血再灌注損傷(IRI)模型,探討病原體相關(guān)分子構(gòu)象識(shí)別受體NALP3對(duì)大鼠腎臟IRI的影響及其作用機(jī)制。
　　 方法：(1)將健康SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組、缺血再灌注(I/R)不同時(shí)間th、2h、4h、8h、16h、24h組、空質(zhì)粒+sham組、空質(zhì)粒+I/R組和siRNA質(zhì)粒+I/R組,摘除右腎一周后夾閉左腎動(dòng)脈制作腎臟IRI模型,轉(zhuǎn)染

2、組摘除右腎后超聲微泡造影技術(shù)完成轉(zhuǎn)染一周后同樣方法制作IRI模型,各組10大鼠,留取血清及腎組織標(biāo)本。(2)對(duì)腎臟組織進(jìn)行病理?yè)p傷半定量分析;檢測(cè)血清Scr、BUN含量的變化。(3)western印跡法半定量分析腎組織NALP3的表達(dá)變化、ERK、JNK、P38磷酸化程度變化;RT-PCR檢測(cè)NALP3mRNA表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：(1)大鼠缺血再灌注不同時(shí)間均發(fā)生不同程度急性腎小管壞死,各組病理評(píng)分中以缺血再灌注4h組病理?yè)p

3、傷最重(P＜0.01)。(2)大鼠缺血再灌注不同時(shí)間血清Scr、BUN水平均有不同程度升高,以4h組最高。(3)與假手術(shù)組比較,NALP3在缺血再灌注th、2h、4h、8h、16h、24h表達(dá)顯著增高(P＜0.05),4h達(dá)到最高,之后趨于穩(wěn)定。(4)與單純?nèi)毖俟嘧?h組比較,siRNA質(zhì)粒+I/R組腎組織病理?yè)p傷明顯減輕,JNK、P38磷酸化程度明顯下降(P＜0.O1),ERK磷酸化程度仍然較高。
　　 結(jié)論：1)NALP3