骨化三醇抑制晚期前列腺癌作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過不同濃度的骨化三醇在不同時(shí)間點(diǎn)體外干預(yù)DU145及PC-3細(xì)胞，評價(jià)其對兩種前列腺癌細(xì)胞增殖及死亡效應(yīng)的影響，進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。希望通過合理的聯(lián)合用藥，優(yōu)化骨化三醇的抗腫瘤效應(yīng)。為臨床治療晚期前列腺癌提供新的思路和理論支持，促進(jìn)臨床轉(zhuǎn)化。
　　方法:選擇DU145及PC-3細(xì)胞。體外擴(kuò)增至足夠數(shù)量。對兩種前列腺癌細(xì)胞實(shí)施不同濃度骨化三醇干預(yù)。在不同的時(shí)間點(diǎn)通過CCK-8檢測細(xì)胞增殖率，臺盼蘭染色計(jì)算細(xì)胞總死亡率，PI

2、染色分析細(xì)胞周期分布，AnnexinⅤ流式細(xì)胞儀檢測早期凋亡。通過westernblot技術(shù)，分析兩種細(xì)胞凋亡和自噬信號通路的激活的狀況。進(jìn)一步通過氯喹阻斷PC-3自噬信號通路，明確其是否有增敏骨化三醇的抗腫瘤效應(yīng)。
　　結(jié)果:骨化三醇體外干預(yù)72小時(shí)內(nèi)，促進(jìn)DU145細(xì)胞增殖，抑制凋亡，對自噬信號通路無明顯影響。骨化三醇抑制PC-3細(xì)胞增殖，促進(jìn)自噬，對凋亡信號通路無明顯影響。骨化三醇聯(lián)合氯喹較單獨(dú)應(yīng)用骨化三醇或氯喹能更好的抑制