枳殼與早實枳中若干成花基因的克隆及表達(dá)分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、多年的童期生長對木本植物,尤其是經(jīng)濟(jì)作物果樹來說一直是備受關(guān)注的問題。如何能夠有效的縮短果樹的童期,進(jìn)而提高育種效率,是果樹分子生物學(xué)研究的重要課題。七十年代末發(fā)現(xiàn)于我國宜昌境內(nèi)某苗圃的一株枳殼的突變體,因其具有比普通枳殼更矮化,童期更短并且可以在一年內(nèi)多次開花的特性而被命名為早實枳(Early poncirus)。早實枳童期短及花芽形成快的特性引起了我們的關(guān)注,我們期望能從對早實枳和枳殼的比較研究當(dāng)中發(fā)現(xiàn)與其早花表型相關(guān)的分子機(jī)理,從

2、而為柑橘從營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)換過程給出科學(xué)的解釋,為進(jìn)一步表型調(diào)控和分子育種提供基礎(chǔ)。 FLOWER LOCUST(FT)基因在植物調(diào)控開花的基因網(wǎng)絡(luò)中作為同時應(yīng)答于光信號和春化信號的調(diào)控節(jié)點,發(fā)揮著整合外界環(huán)境光信號和溫度信號的重要作用。CONSTANS(CO)是刀的上游光周期調(diào)控基因,而TERMINAL FLOWER(TFL)基因是與刀序列相似、作用相反的開花抑制因子。 本研究以木本植物枳殼及其早花突變體-早實枳為

3、材料,對上述三個基因進(jìn)行了克隆與表達(dá)分析,主要結(jié)果如下: 1.克隆得到枳殼和早實枳CO基因621bp的cDNA片段;與擬南芥的CO的核苷酸序列的同源性達(dá)到70%,依據(jù)推測的氨基酸序列與其他植物CO同源基因的聚類分析表明,CO基因在進(jìn)化過程中有較強(qiáng)的保守性。 2.克隆得到枳殼和早實枳刀的全長基因;基因全長626bp,與溫州蜜柑的FT基因序列僅有4個堿基的差異,與擬南芥的FT氨基酸序列比較同源性為74%。 3.克隆得

4、到枳殼和早實枳長606bp的TFL同源基因;它與甜橙的TFL基因序列僅有10個堿基的差異,與擬南芥的TFL氨基酸序列比較同源性為73%。 4.早實枳與普通枳中,TFL與FT基因的堿基序列與拷貝數(shù)沒有差異。 5.通過半定量RT-PCR方法對上述3基因的表達(dá)分析發(fā)現(xiàn),CO和刀基因在枳殼和早實枳中的表達(dá)有一定的相關(guān)性;童期TFL基因表達(dá)量高與其維持花芽的未分化狀態(tài)的功能相一致;成花期刀的表達(dá)也印證了其促進(jìn)開花的功能。

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