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文檔簡介
1、目的:利用肝癌細胞表面高表達轉鐵蛋白受體(transferrin receptor,TfR)的特點,構建轉鐵蛋白受體介導的Survivin反義RNA/HSP70雙基因轉移系統(tǒng)并觀察其對人肝癌細胞的靶向殺傷效應。 方法:用EDC法制備轉鐵蛋白受體抗體(即CD71抗體)與多聚左旋賴氨酸(PLL)的復合物,將攜帶有外源基因的質粒DNA與轉鐵蛋白受體抗體結合在一起,形成一種可溶性的蛋白-核酸復合物。根據(jù)DNA阻滯實驗的結果,重組質粒與A
2、b-PLL復合物按1:1混合,得到Ab-PLL-DNA雙基因轉移系統(tǒng),將此復合物通過體外轉染人肝癌HepG2細胞觀察其對肝癌細胞的靶向殺傷效應。 結果:成功制備了Ab-PLI-pIRES2-DsRed2 Survivin反義RNA/HSP70雙基因轉移系統(tǒng),并通過TfR的內吞作用將外源基因導入肝癌細胞并得以表達。轉染復合物組HepG2細胞的增殖抑制、凋亡指數(shù)增加、熱休克蛋白70表達增強。 結論:Ab-PLL-DNA雙基因
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