鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶CaN Aα和CaN Aβ在肺癌中的表達及意義.pdf

1、肺癌的發(fā)病率和死亡率居惡性腫瘤的首位，5年生存率僅為16％。導(dǎo)致肺癌患者死亡的主要原因是肺癌細胞的遠處轉(zhuǎn)移。骨骼是肺癌細胞常見的轉(zhuǎn)移部位，約30％-40％的肺癌患者可發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，肺癌骨轉(zhuǎn)移可引起轉(zhuǎn)移部位疼痛、脊髓壓迫、截癱和高鈣血癥等，嚴重影響著肺癌患者的生活質(zhì)量，肺癌骨轉(zhuǎn)移是臨床上迫切需要解決的難題。
　　導(dǎo)致肺癌骨轉(zhuǎn)移治療困難的一個重要原因，是目前對肺癌骨轉(zhuǎn)移的機理還不很清楚。對肺癌骨轉(zhuǎn)移機理的深入研究，是探討肺癌骨轉(zhuǎn)移新的治

2、療方法的基礎(chǔ)。
　　骨的重塑是一個動態(tài)的過程，在這個過程中成骨細胞和破骨細胞發(fā)揮著重要作用。腫瘤骨轉(zhuǎn)移發(fā)生機制是由于腫瘤細胞、破骨細胞和成骨細胞三者相互影響，導(dǎo)致正常骨骼重建失衡所致。Ca2+作為第二信使在調(diào)節(jié)腫瘤骨轉(zhuǎn)移的細胞生理與病理過程中起重要作用，CaN/NFAT信號通路耦聯(lián)骨形成和骨吸收。
　　鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶是目前惟一已知的細胞內(nèi)鈣調(diào)素依賴的絲氨酸／蘇氨酸蛋白磷酸酶，細胞內(nèi)的CaN約一半位于胞漿，另一半與質(zhì)膜結(jié)合。在

3、腦、心臟及骨骼肌中較高表達，肺、腎及肝組織中均存在，提示其可能存在重要的生理作用。目前，關(guān)于鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶Aα和Aβ與肺癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的關(guān)系尚未見報道。
　　目的：檢測鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（calcineurin，CaN）Aα和Aβ亞基蛋白在肺癌細胞系及肺癌患者腫瘤組織中的表達，研究CaN蛋白亞基的表達與肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生是否相關(guān)。為臨床肺癌骨轉(zhuǎn)移的治療提供理論依據(jù)。
　　方法：通過免疫組織化學(xué)方法檢測肺癌骨轉(zhuǎn)移和肺癌無骨轉(zhuǎn)移患者肺癌組

4、織中CaNAα和Aβ的表達。病例來自第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院2004年6月～2008年12月因肺癌住院手術(shù)病例，共89例（鱗癌28例、腺癌28例，小細胞肺癌33例），根據(jù)臨床和影像學(xué)檢查將患者分為兩個亞組。A組：肺癌不伴骨轉(zhuǎn)移患者，49例。B組：肺癌伴骨轉(zhuǎn)移患者，40例。病例檢查結(jié)果由兩位病理科醫(yī)生分別閱片。
　　應(yīng)用PCR和Westernblot方法檢測CaNAα和CaNAβ在特異性骨轉(zhuǎn)移細胞株SBC-5和非骨轉(zhuǎn)移細胞株SBC-3和

5、NCI-H345中基因和蛋白水平上的表達。
　　結(jié)果：1.肺鱗癌、肺腺癌和小細胞癌肺癌CaNAα的陽性率骨轉(zhuǎn)移組較非骨轉(zhuǎn)移組分別高約43.75％、42.9％、56.5％，CaNAβ的陽性率骨轉(zhuǎn)移組較非骨轉(zhuǎn)移組分別高約37.5％、42.9％、60.9.％。采用Mann-WhitneyU檢驗發(fā)現(xiàn)兩蛋白在肺癌骨轉(zhuǎn)移組（n=40）和非骨轉(zhuǎn)移組（n=49）中的CaNAα和CaNAβ表達強度均有統(tǒng)計學(xué)差異（CaNAαZ=19.176，P=0.

6、000；CaNAβZ=15.248，P=0.000P＜0.05）。采用Kruskal-WallisH檢驗發(fā)現(xiàn)CaNAα和CaNAβ在鱗癌組（n=28）、腺癌組（n=28）和小細胞癌組（n=33）中的表達強度無統(tǒng)計學(xué)差異（CaNAα=5.117，P=0.079；CaNAβ=4.883，P=0.094P>0.05）。χ2χ2
　　2.通過灰度分析來對比分析RT-PCR和Westernblot的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)SBC-5細胞中的CaNAα和C