心衰患者外周血和心肌組織中鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶mRNA水平相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：慢性心力衰竭是多種心血管疾病的終末期表現(xiàn)，是導(dǎo)致心源性死亡的重要原因。心肌肥厚是臨床上發(fā)生心力衰竭的早期過程，常與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路介導(dǎo)的病理性基因表達(dá)有關(guān)。鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(calcineurin,CaN)作為一種多功能信號(hào)酶，在心肌組織中廣泛分布，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在心肌肥厚發(fā)生機(jī)制中起到重要作用。心臟負(fù)荷增加時(shí)，在血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素-1、尾加壓素Ⅱ等刺激下，細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度增加，Ca2+與CaN的調(diào)節(jié)亞基CnB結(jié)合，誘發(fā)

2、催化亞基CnA構(gòu)象改變，使其自身抑制域移位，暴露磷酸酶活性位點(diǎn)，CaN激活；細(xì)胞內(nèi)的活化T細(xì)胞核因子(nuclear factor of activated T cell，NFAT)去磷酸化并進(jìn)入胞核，與其他轉(zhuǎn)錄因子(包括MEF2、GATA4、AP-1等)或信號(hào)通路協(xié)同作用調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄，活化心肌肥厚相關(guān)基因，如：肌球蛋白重鏈(myosin heavy chain，MHC)由以α-MHC為主向以β-MHC為主演變，心臟成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)移

3、生長(zhǎng)因子β(TGF-β)合成也增加。同時(shí)誘導(dǎo)使心肌細(xì)胞增殖的原癌基因，如c-fos、c-myc、c-jun等的表達(dá)。最終心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)和核酸合成增加，細(xì)胞體積增大，導(dǎo)致病理性心肌肥厚發(fā)生。 心力衰竭發(fā)生時(shí)，心肌組織中CaN活性增高，外周血中CaN活性也升高且與左心室肥厚程度成正相關(guān)。但CaN在外周血和心肌組織mRNA水平的表達(dá)是否增高還研究較少，因而從mRNA水平探討CaN在外周血和心肌組織的變化及二者的關(guān)系對(duì)進(jìn)一步了解CaN的

4、作用及心肌肥厚的發(fā)生機(jī)制有重要的意義。 研究目的：研究慢性心力衰竭患者外周血淋巴細(xì)胞與心肌組織中鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶mRNA的相關(guān)性。 研究方法：選擇2007年1月至2007年8月入住山東省立醫(yī)院因二尖瓣狹窄并關(guān)閉不全接受二尖瓣置換術(shù)的患者38例，正常對(duì)照組12例(其中2例來(lái)自意外事故死亡的器官捐獻(xiàn)者)，彩色多普勒超聲心動(dòng)圖測(cè)量心功能參數(shù)。取研究對(duì)象靜脈血及少量左心室前乳頭肌，分離靜脈血淋巴細(xì)胞后，分別提取淋巴細(xì)胞及左心室乳頭

5、肌組織的總RNA，采用半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)測(cè)定外周血淋巴細(xì)胞與心肌組織中CaNA亞基CnAα和CnAβ異構(gòu)體mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：慢性心力衰竭患者外周血淋巴細(xì)胞和心肌組織中的CaNA mRNA水平呈正相關(guān)(CnAα mRNA r=0.820，p<0.01；CnAβ mRNA r=0.875，p<0.01)。心力衰竭患者外周血淋巴細(xì)胞和心肌組織CnAα和CnAβ mRNA水平較正常對(duì)照組升高，且隨心力衰竭