抗腫瘤藥物靶蛋白：DUSP26和Tks4的結(jié)構(gòu)與反應(yīng)機(jī)制的研究.pdf

1、解析抗腫瘤藥物作用靶蛋白的結(jié)構(gòu)和功能的相互關(guān)系是開(kāi)展抗腫瘤新藥的篩選的前提。本項(xiàng)研究中開(kāi)展了人體內(nèi)的兩個(gè)抗腫瘤藥物靶點(diǎn)蛋白質(zhì):二重特異性去磷酸化酶26(Dual-specificity phosphatase26，簡(jiǎn)稱(chēng)DUSP26)和Tks4的結(jié)構(gòu)與功能研究。在本論文中，第一篇報(bào)道DUSP26的反應(yīng)機(jī)制研究和利用計(jì)算機(jī)輔助藥物篩選的DUSP26小分子抑制劑發(fā)現(xiàn)研究的結(jié)果，第二篇報(bào)道Tks4的C-端Src homology3(SH3)結(jié)構(gòu)

2、域的晶體學(xué)研究結(jié)果。
　　DUSP26是近期確定的抗甲狀腺未分化癌等腫瘤藥物作用的新靶標(biāo)。作者的導(dǎo)師已經(jīng)成功測(cè)定了DUSP26的催化結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)，但DUSP26的反應(yīng)機(jī)理尚不明確。為了獲得靶向DUSP26的抗腫瘤新藥的先導(dǎo)化合物，本項(xiàng)研究首先利用對(duì)硝基苯磷酸為底物的酶促動(dòng)力學(xué)開(kāi)展DUSP26反應(yīng)機(jī)制研究，從研究結(jié)果中獲得可作為藥物作用靶位后，利用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)技術(shù)構(gòu)建了用于分子對(duì)接篩選的藥效團(tuán)模型，而后利用分子對(duì)接法從中國(guó)醫(yī)學(xué)

3、科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所微生物來(lái)源天然化合物庫(kù)和百靈威公司化合物庫(kù)實(shí)施虛擬篩選，獲得了232種候選化合物。以對(duì)硝基苯磷酸為底物，驗(yàn)證這些候選化合物的對(duì)DUSP26的抑制活性，從中發(fā)現(xiàn)了8種化合物具有抑制活性，其中的化合物2-hydroxy-4-{6-[(5Z)-5-[(4-methylphenyl)methylidene]-4-oxo-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl]hexana

4、mido}benzoic acid的抑制活性高于已知唯一的DUSP26的抑制劑NSC-87877。研究結(jié)果證明了本人推測(cè)的DUSP26反應(yīng)機(jī)制的準(zhǔn)確性，化合物可以作為靶向DUSP26的抗腫瘤藥物先導(dǎo)化合物開(kāi)展進(jìn)一步的研究。
　　人體內(nèi)的抗腫瘤藥物靶蛋白Tks4的空間結(jié)構(gòu)尚不明確，為了解析它的結(jié)構(gòu)和功能的相互關(guān)系，開(kāi)展了Tks4的C端SH3結(jié)構(gòu)域的晶體學(xué)研究。迄今為止，完成了這個(gè)結(jié)構(gòu)域的大腸桿菌原核表達(dá)、純化、結(jié)晶化和X射線衍射數(shù)據(jù)