蜈蚣抗腫瘤蛋白的分離純化與藥理機制初探.pdf

1、目的: 蜈蚣具有確切的中醫(yī)抗腫瘤臨床基礎。本課題旨在追蹤蜈蚣主要抗腫瘤蛋白，并初步探討蜈蚣蛋白的抗腫瘤藥理機制。 方法: 1.蜈蚣抗腫瘤蛋白的分離純化研究采用(NH<,4>)<,2>SO<,4>沉淀、Septaadex G-25凝膠過濾層析除鹽并粗分、Q Sepharose fast flow離子交換層析、Sephadex G-200凝膠過濾層析對蜈蚣蛋白進行分離純化，并采用MTT法進行體外抑瘤活性檢測，以追蹤蜈

2、蚣主要抗腫瘤活性蛋白。 2.抗腫瘤蛋白組分CG Ⅰ <'1>的藥理機制研究采用人宮頸癌Hela和胃腺癌BGC-823兩種細胞株，從誘導腫瘤細胞凋亡與細胞毒性的角度探索蜈蚣蛋白組分CG Ⅰ的藥理機制。 誘導腫瘤細胞凋亡方面，本論文選取了吉姆薩染色、吖啶橙/溴化乙錠熒光雙染色、吖啶橙染色等形態(tài)學方法與DNA碎片的瓊脂糖凝膠電泳分析等指標。 細胞毒性方面，本論文選取MTT、乳酸脫氫酶漏出率檢測和細胞蛋白質含量測定等指標

3、。 結果: 本實驗研究首次對蜈蚣抗腫瘤蛋白進行了較深入的分離純化。變性凝膠電泳顯示，所得活性最強的蛋白組分含8條清晰條帶。分離純化后的蛋白組分體外抑瘤活性較蜈蚣總蛋白提高了近10倍。 MTT實驗結果顯示，蜈蚣蛋白組分CG Ⅰ有很強的體外抗宮頸癌Hela細胞和胃癌BGC-823作用，呈明顯的量效關系和較明顯的時效關系：且CG Ⅰ作用后，細胞LDH漏出率增高，細胞中蛋白質明顯減少；通過三種染色觀察，該蛋白組分能使細胞