髓樣化因子88(MyD88)功能區(qū)變異顯著影響中國荷斯坦奶牛臨床型乳腺炎易感性.pdf

1、乳腺炎是奶牛最常見的疾病之一,目前仍然沒有被攻克,臨床型乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖戶面臨的嚴重問題,造成巨大的經(jīng)濟損失。革蘭氏陰性菌是引起奶牛臨床型乳腺炎的重要原因,而且患臨床型乳腺炎的奶牛往往有明顯的臨床癥狀,甚至會引起個體的死亡。Toll樣受體( Tol-l like receptors,TLRs)家族是一組具有重要功能的,且介導天然免疫的模式識別受體。雖然不同的TLR所識別的病原相關分子(PAMPs)有所側(cè)重,髓樣分化因子88(myeloi

2、d differentiation factor88,MyD88),依舊是此類受體信號轉(zhuǎn)導通路中關鍵的連接蛋白,也是信號向下游轉(zhuǎn)導的關鍵靶分子。在奶牛臨床型乳腺炎中主要作用是介導促炎癥反應和免疫抑制信號傳遞。然而,MyD88基因突變及其對奶牛臨床乳腺炎的易感性鮮為人知的。
　　本文應用單鏈構(gòu)象多態(tài)方法(single-strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)分析中國荷斯坦奶牛MyD88基

3、因的多態(tài)。5個與乳腺炎相關的單核苷酸多態(tài)(single nucleotide polymorphism,SNP)被發(fā)現(xiàn),分別在外顯子1、內(nèi)含子2、外顯子3和內(nèi)含子4。第一外顯子信號肽部位的1個SNP位點g.9 A→C(3Glu→Asp)位于等位基因B,導致蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的改變;在成熟的MyD88蛋白中,兩個關鍵的SNPs導致氨基酸的改變:g.1755 G→A(180Arg→Gln)位于等位基因F, g.1858 G→T(214 Lys→

4、Asn)位于等位基因G。它們都影響蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu),但對六種預測蛋白進行三級結(jié)構(gòu)預測分析發(fā)現(xiàn)它們完全一致。有趣的是, BB(突變型g.9 A/C),CD(雜合型g.1516 C/G), FF(突變型g.1755 G/A),GG(突變型g.1858 G/T)以及II(突變型g.2270 A/G)這些基因型的奶牛發(fā)病率明顯高于本研究中的其他基因型(p<0.01)。研究結(jié)果表明,這些SNPs可能影響了MyD88蛋白的分泌和MyD88蛋白對TL