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1、葉酸在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變?yōu)樗臍淙~酸,充當(dāng)一碳單位轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)中的輔酶,從而參與蛋氨酸的合成,嘌呤的合成以及胸腺嘧啶核苷酸的合成等生物途徑。白念珠菌是一種重要的條件致病真菌。白念珠菌CaFOL1和CaFOL2基因的ORF全長(zhǎng)分別是2367bp和831bp,分別編碼含有788個(gè)氨基酸殘基和276個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。為了研究CaFOL1和CaFOL2是否在體內(nèi)四氫葉酸合成途徑中發(fā)揮重要作用,我們使用URA-BLASTER技術(shù)構(gòu)建了白念珠菌CaFOL
2、1和CaFOL2基因的單等位基因缺失株和雙等位基因缺失株。表型分析表明白念珠菌CaFOL2雙等位基因缺失株(fol2△/fol2△)在不添加外源葉酸時(shí)不能存活。我們將白念珠菌CaFOL2基因克隆到白念珠菌表達(dá)載體pCR4上,把構(gòu)建的pCR4-CaFOL2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到CaFOL2的雙等位基因缺失株中。含有pCR4-CaFOL2質(zhì)粒的缺失株能夠在不添加外源葉酸的環(huán)境下生長(zhǎng)。這些結(jié)果表明CaFOL2基因是白念珠菌四氫葉酸合成所需要的。然而,我們
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