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文檔簡介
1、目的:研究蕨麻有效部位ND對垂體后葉素致小鼠急性心肌缺血損傷的保護作用,探討其可能機制。 方法:小鼠腹腔注射20 U/kg垂體后葉素30min,建立急性心肌缺血模型,監(jiān)測心電圖變化。通過HE染色、NagarOlsen染色、透射電鏡技術及生化指標(LDH、CK)的檢測觀察不同劑量ND對急性心肌缺血損傷的保護作用;通過檢測生化指標(SOD、MDA、NO、NOS)、免疫組化染色(iNOS、p38、p-p38、cyt-c、caspase
2、3-p20)及RT-PCR(caspase9、caspase3)技術,探討其作用的可能機制。 結果:1 ND對垂體后葉素致小鼠急性心肌缺血損傷的保護作用:(1)心電圖:與模型組相比,不同劑量ND均能顯著降低缺血所致心電圖J點的抬高(P<0.01);但未顯示劑量依賴性。而ND對缺血小鼠心率無明顯影響(P>0.05)。(2)Nagar Olsen染色:ND干預后,心肌組織缺血紅染面積明顯減少。(3)透射電鏡:ND干預后,缺血所致肌纖
3、維紊亂、線粒體膜和嵴融合、間質水腫等超微結構損傷均顯著減輕。(4)血生化:高、中劑量ND干預組(與模型組相比)均可顯著降低缺血損傷小鼠血清LDH活性(P<0.01)、CK活性(P<0.05);而低劑量ND干預組,小鼠血清中LDH、CK活性與缺血模型組比較無統(tǒng)計學差別(P>0.05)。LDH、CK活性降低程度均具有劑量依賴性。 2 ND對垂體后葉素致小鼠急性心肌缺血損傷保護作用的機制研究:(1)血生化:高、中劑量ND干預組與模型組相比,可
4、顯著提高小鼠血清中SOD活力(P<0.01),減少MDA的產(chǎn)生(P<0.05),并降低NO含量(P<0.01),升高NOS水平(P<0.01);而低劑量ND干預組,小鼠血清中SOD活力、MDA含量、NO含量及NOS水平與缺血模型組比較均無統(tǒng)計學差別(P>0.05)。且血清SOD、MDA、NO、NOS變化程度均具有劑量依賴性。(2)免疫組化染色:高、中劑量ND干預組與模型組相比,可顯著降低缺血小鼠心肌組織iNOS(P<0.01)、p-p3
5、8(P<0.01)、caspase3-p20(P<0.01)蛋白表達。而低劑量ND干預組與模型組相比,小鼠心肌組織p-p38、iNOS、caspase3-p20表達水平均無統(tǒng)計學差別(P>0.05)。高劑量ND組與模型組相比,可顯著降低缺血小鼠心肌組織cyt-c蛋白表達(P<0.01),而中、低劑量ND組與模型組相比,小鼠心肌組織cyt-c表達水平均無統(tǒng)計學差別(P>0.05)。(3):RT-PCR:高、中、低劑量ND與模型組相比,均可
6、在mRAN水平顯著降低缺血小鼠心肌組織caspase 9表達(P<0.01)。 結論:蕨麻ND可降低缺血所致心電圖J點抬高、縮小心肌缺血損傷面積、減輕心肌超微結構損傷程度、減少缺血損傷心肌酶的釋放,對垂體后葉素致小鼠急性心肌缺血損傷具有明顯保護作用。這種保護作用的機制可能為減少自由基的產(chǎn)生,提高機體清除自由基的能力;增加NO產(chǎn)生;通過p-38 MAPK途徑減少損傷信號的跨膜傳遞,降低cyt-c的水平,使caspases級聯(lián)反應減
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