MED1在乳腺癌治療中的作用機(jī)制研究.pdf

1、A D i s s e r t a t i o nS u b m i t t e d t oZ h e j i a n g U n i v e r s i t yf o rt h eD e g r e eo f D o c t o ro f P h i l o s o p h yI n v e s t i g a t i o no nt h e r o l eo f M E D 1i nt h eD r e a s tC a n c e

2、 rt n e r a D V●■_ _ _ _ _ ■■■■■■■■■■_ _ _ _ _ ■■■■■■■■■■■■_ ●■_ _ _ _ _ _ _ ■■●■■■■■■一m I -A u t h o r ： L U i 壘墮g 圣h 墾旦gS u p e r v i s o r ： Y Q 壘g ：Q 墜亟墮L iS u b j e c t ：C o l l e g e ：X i 魚Q ±i 墜g 圣h 魚里gg Q l

3、! 星g 星Q ￡L i 魚苧堡i 星墜堡星S u b m i t t e dD a t e ： 苧竺乜! 曼磐墜竺12 Q ! 蘭浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 摘要摘要乳腺癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅女性的健康與生命，而近年來(lái)我國(guó)乳腺癌發(fā)病率快速上升，在全國(guó)多數(shù)大城市中乳腺癌已占據(jù)女性惡性腫瘤之首。以雌激素受體( E R ) 為靶點(diǎn)的純抗雌激素內(nèi)分泌治療藥物F u l v e s t r a n t ( 氟維司群) 在乳腺癌臨床控制中發(fā)

4、揮著重要作用，然而隨之而來(lái)的耐藥性問(wèn)題大大減弱了其治療效果；同時(shí)，遠(yuǎn)端的侵襲轉(zhuǎn)移更是導(dǎo)致乳腺癌患者死亡的最大誘因。內(nèi)分泌治療耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移已成為乳腺癌臨床治療面臨的兩大難題。轉(zhuǎn)錄中介體亞基1 ( M E D l ) 作為E R 關(guān)鍵的共激活因子，在E R 依賴的基因表達(dá)和雌激素依賴的乳腺癌生長(zhǎng)過(guò)程中起到關(guān)鍵性作用，而且參與了另一類內(nèi)分泌治療藥物T a m o x i f e n 的耐藥形成過(guò)程，與乳腺癌患者的不良預(yù)后有著高度相關(guān)性。針對(duì)

5、上述乳腺癌治療的兩大難題，并鑒于已報(bào)道的M E D l 在乳腺癌中貢獻(xiàn)作用，本論文對(duì)M E D l 在乳腺癌治療時(shí)F u l v e s t r a n t 耐藥及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用進(jìn)行了較系統(tǒng)的科學(xué)分析，并對(duì)其分子機(jī)理做了較深入的機(jī)制研究。1 、成功建立了可穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶和誘導(dǎo)型M E D ls h R N A 的可誘導(dǎo)型M E D l 沉默乳腺癌細(xì)胞株( M C F 7 ．t e t ．s h M E D l 、B T 4 7

6、 4 ．t e t —s h M E D l 、Z R 7 5 ．1 ．t e t - s h M E D l ) 。在確保d o x y e y c l i n e ( D o x ) 誘導(dǎo)M E D l 表達(dá)確實(shí)明顯下調(diào)的同時(shí)，驗(yàn)證分析了M E D l 對(duì)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖中的關(guān)鍵作用：M E D l 沉默明顯抑制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、貼壁克隆及非貼壁軟瓊脂克隆形成。這些誘導(dǎo)型細(xì)胞株的建立，為后續(xù)試驗(yàn)提供了可靠的實(shí)驗(yàn)材料保障。2 、首次對(duì)M

7、 E D I 在乳腺癌內(nèi)分泌治療藥物F u l v e s t r a n t 耐藥性中的貢獻(xiàn)作用做了較為系統(tǒng)的科學(xué)分析及機(jī)制研究。體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究揭示，沉默M E D l 增強(qiáng)了F u l v e s t r a n t 耐藥乳腺癌細(xì)胞株B T 4 7 4 、Z R 7 5 ．1 和M C F 7 ．F 細(xì)胞( 體外實(shí)驗(yàn))以及B T 4 7 4 細(xì)胞裸鼠原位移植瘤( 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)) 對(duì)F u l v e s t r a n t 藥物處理