新型ER共調(diào)節(jié)因子在乳腺癌發(fā)生中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、乳腺癌是目前威脅女性健康最常見的惡性腫瘤之一，雌激素信號通路在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色。ER信號通路與其他通路調(diào)控關(guān)系密切，ER既可以通過經(jīng)典的核轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑介導(dǎo)多種細(xì)胞廣泛的生理效應(yīng)，又可以通過膜轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑實現(xiàn)快速信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞的增殖。ER信號通路作為胞內(nèi)復(fù)雜信號交互網(wǎng)絡(luò)的組成部分，其異常調(diào)控與腫瘤惡化、轉(zhuǎn)移和內(nèi)分泌治療耐受密切相關(guān)。ER與共調(diào)節(jié)因子相互作用，受其影響并發(fā)揮生物學(xué)功能，因此發(fā)現(xiàn)并研究新的ER共調(diào)節(jié)因子

2、對于完善ER信號通路、闡明乳腺癌的發(fā)病機(jī)理、探索乳腺癌的治療方法、開發(fā)有效的治療藥物都具有重要意義。
　　本文研究雌激素受體相互作用蛋白-GA5，而且GA5是雌激素信號通路中的共調(diào)節(jié)因子。免疫共沉淀實驗證明了GA5與ERβ、ERa的DBD結(jié)構(gòu)域相互作用，并且ERβ與GA5Δcoil-coil結(jié)構(gòu)域相互作用。為了進(jìn)一步研究GA5的生物學(xué)功能，利用酵母雙雜交的實驗發(fā)現(xiàn)GA5能與SUMO化相關(guān)的酶類相互作用。經(jīng)過我們的研究發(fā)現(xiàn)GA5能發(fā)

3、生SUMO化，且能增強(qiáng)ERβ的SUMO化，但是不能增強(qiáng)ERβK4R的SUMO化。進(jìn)一步的研究表明GA5Δcoil-coil不能增強(qiáng)ERβ的SUMO化。熒光素酶活性的測定GA5能降低ERβ的活性，半衰期實驗表明GA5能穩(wěn)定ERβ的蛋白水平量，Real-time PCR確定GA5調(diào)節(jié)ERβ下游基因P21和PRb。激光共聚焦實驗表明GA5定位在核斑點序列上，且GA5（1-147）的片段使其定位在核斑點上；生長曲線實驗說明GA5能抑制ZR751