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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察Aurora kinase inhibitor VX680對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響,探討其作用機(jī)制;初步探究VX680與Taxol聯(lián)用對(duì)卵巢癌細(xì)胞的作用
方法:采用CCK8的方法檢測(cè)不同濃度VX680對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)VX680在腫瘤細(xì)胞中引起的周期阻滯和凋亡,western blot檢測(cè)VX680作用后細(xì)胞內(nèi)Aurora kinase,H3P,PARP等蛋白表達(dá)水平的變化;CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)
2、檢測(cè)VX680和Taxol聯(lián)用引起的細(xì)胞增殖抑制和凋亡
結(jié)果:VX680抑制腫瘤細(xì)胞增殖CCK8結(jié)果顯示加藥72h后,與對(duì)照組相比,Hela,A2780,SKOV3細(xì)胞增殖受到明顯抑制;隨著藥物濃度的增加,抑制率增加:Hela細(xì)胞內(nèi),藥物濃度為100nM時(shí)抑制率為13.7%,1μM抑制率為30.8%;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)周期結(jié)果顯示VX680作用于Hela48h后,細(xì)胞內(nèi)8N明顯增多,熒光顯微鏡下觀察到細(xì)胞核有復(fù)雜變化,核碎裂,細(xì)胞
3、內(nèi)多核,核多形性常見;western blot結(jié)果顯示,VX680能夠抑制細(xì)胞內(nèi)Aurora kinase A,B的表達(dá),細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白(PARP,cleaved-caspase-3)表達(dá)升高;卵巢癌細(xì)胞中,一定濃度范圍內(nèi),VX680與Taxol聯(lián)用能夠產(chǎn)生協(xié)同作用,抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
結(jié)論:Aurora kinase inhibitor VX680可以抑制細(xì)胞內(nèi)Aurora kinase的表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)
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