蛇床子素的雌激素樣作用對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、阿爾茨海默?。ˋlzheimer's Disease，AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，表現(xiàn)為認(rèn)知障礙、記憶缺失、行為錯(cuò)亂等，嚴(yán)重影響患者的身體健康及家屬的生活質(zhì)量。流行病學(xué)調(diào)查顯示絕經(jīng)婦女患AD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯增加，其發(fā)病率較同齡男性高2～3倍。研究顯示雌激素能夠改善絕經(jīng)婦女的認(rèn)知障礙，表明雌激素與AD密切相關(guān)。
　　蛇床子素（Osthole，Ost）又名甲氧基歐芹酚，是中藥蛇床子的活性成分，具有雌激素樣作用，能夠升高去卵巢致骨

2、質(zhì)疏松大鼠的血清雌二醇水平。另外，前期研究證實(shí)蛇床子素能夠改善東莨菪堿、大腦中動(dòng)脈阻斷等所致學(xué)習(xí)記憶障礙，調(diào)節(jié)腦內(nèi)膽堿酯酶活性、谷氨酸(Glutamic acid，Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)水平等。本研究旨在考察蛇床子素的雌激素樣作用與其促學(xué)習(xí)記憶能力的相關(guān)性及可能的作用機(jī)制。
　　選用21日齡Sprague Dawley(SD)大鼠，通過(guò)子宮增重試驗(yàn)比較蛇床子素和雌二醇的雌激素效能

3、，進(jìn)一步通過(guò)兩因素析因設(shè)計(jì)考察二者聯(lián)合用藥的交互作用。選用3月齡SD大鼠，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組、去卵巢模型組、雌二醇組、蛇床子素12，3 mg·kg-1劑量組。通過(guò)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)考察蛇床子素對(duì)去卵巢大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。術(shù)后第15周，考察蛇床子素對(duì)去卵巢大鼠陰道脫落細(xì)胞角化指數(shù)（Comification index，CI）的影響。術(shù)后第16周，每組隨機(jī)選7只大鼠，測(cè)定其子宮系數(shù)，血清雌二醇水平，前皮層和海馬的天冬氨酸(Asp

4、articacid, Asp)、谷氨酸、甘氨酸(Glycine，Gly)、γ-氨基丁酸的水平;檢測(cè)每組剩余7只大鼠海馬區(qū)N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-asparticacid, NMDA)受體及突觸素(Synaptophysin，SYN)的表達(dá)。
　　1、蛇床子素和雌二醇對(duì)21日齡大鼠子宮系數(shù)的影響
　　結(jié)果顯示，蛇床子素給藥量為3.00～12.00 mg·kg-1或雌二醇給藥量為4.69～4.80×103μ

5、g·kg-1時(shí)，21日齡大鼠子宮系數(shù)表現(xiàn)為藥物相關(guān)的劑量依賴性增加;雌二醇增加21日齡大鼠子宮系數(shù)的最大效能是蛇床子素的2.34倍。蛇床子素與雌二醇聯(lián)合用藥存在交互作用:雌二醇給藥量低于37.5μg·kg-1時(shí)，蛇床子素劑量依賴的協(xié)同雌二醇增加21日齡大鼠子宮系數(shù);雌二醇給藥量高于3.00×102μg·kg-1時(shí)，蛇床子素劑量依賴的拮抗雌二醇導(dǎo)致的21日齡大鼠子宮系數(shù)增加。
　　2、蛇床子素對(duì)去卵巢大鼠的雌激素樣作用
　　與

6、假手術(shù)組相比，模型組大鼠的陰道脫落細(xì)胞涂片為大量白細(xì)胞、少量有核細(xì)胞，角化指數(shù)、血清雌二醇水平顯著降低(P＜0.01，P＜0.01)，大鼠子宮明顯萎縮，子宮系數(shù)系數(shù)顯著下降(P＜0.01);與模型組相比，雌二醇組、蛇床子素12 mg·kg-1組陰道脫落細(xì)胞涂片持續(xù)呈現(xiàn)大量角化細(xì)胞，二者角化指數(shù)、血清雌二醇水平均顯著增加(P＜0.01，P＜0.05;P＜0.01，P＜0.05)，子宮萎縮改善，子宮系數(shù)顯著增加(P＜0.01，P＜0.05)

7、。
　　3、蛇床子素對(duì)去卵巢大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
　　隨著訓(xùn)練次數(shù)增加，各組大鼠潛伏期逐漸縮短。實(shí)驗(yàn)第4天，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠潛伏期明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)，實(shí)驗(yàn)第5天，模型組大鼠逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)（P＜0.05），穿越目標(biāo)次數(shù)明顯減少(P＜0.01);與模型組相比，雌二醇組、蛇床子素12 mg·kg-1組大鼠潛伏期均明顯縮短（P＜0.01，P＜0.05），二者逃避潛伏期明顯縮短(P＜0.05，P＜0.05)，穿越次數(shù)

8、明顯增加(P＜0.01，P＜0.05)。
　　術(shù)后第16周，與假手術(shù)組比，模型組大鼠前皮層及海馬Glu含量顯著降低(P＜0.01，P＜0.01)，GABA含量顯著增加（P＜0.05，P＜0.01），Glu/GABA顯著下降（P＜0.01，P＜0.01）;與模型組相比，雌二醇組大鼠前皮層及海馬Glu含量顯著增加(P＜0.05，P＜0.05)，海馬GABA顯著降低(P＜0.05)，前皮層及海馬Glu/GABA顯著增加(P＜0.01，P

9、＜0.01)。與模型組相比，蛇床子素兩給藥組大鼠前皮層及海馬的四種氨基酸含量均無(wú)顯著變化。與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬NMDA受體及突觸素表達(dá)均顯著降低（P＜0.01，P＜0.01）;與模型組相比，雌二醇組和蛇床子素12 mg·kg-1組海馬NMDA受體及突觸素表達(dá)均顯著增加(P＜0.01,P＜0.01;P＜0.01,P＜0.01)。
　　蛇床子素具有雌激素樣作用，表現(xiàn)為增加21日齡大鼠子宮系數(shù)，增加去卵巢大鼠的陰道脫落細(xì)胞角化