UCH-L1對惡性腦膠質瘤細胞缺氧適應性的調控研究.pdf

1、 碩士學位論文 論文題目 UCH-L1 對惡性腦膠質瘤細胞缺氧適 應性的調控研究 研 究 生 姓 名 周 磊 指導教師姓名 楊金銘 專 業(yè) 名 稱 藥理學 研 究 方 向 腫瘤藥理 論文提交日期 2013 年 3 月 UCH-L1 對惡性腦膠質瘤細胞缺氧適應性的調控研究 中文摘要 I UCH-L1 對惡性腦膠質瘤細胞缺氧適應性的調控研究 中文摘要 目的： 目的：研究 UCH-L1 對惡性腦膠質瘤細胞缺氧適應性的影響并初

2、步探討其可能的分子機制。 方法： 方法：我們使用 UCH-L1 siRNA 靶向抑制惡性膠質瘤細胞 U251 和 T98G 中UCH-L1 的表達。在缺氧環(huán)境下，1）采用劃痕法、Matrigel 法分別檢測惡性膠質瘤細胞的遷移和侵襲能力的變化；2）采用臺盼藍、克隆集落實驗檢測惡性膠質瘤細胞的存活和增殖能力的變化；3）采用乳酸和葡萄糖試劑盒檢測惡性膠質瘤細胞糖酵解能力的變化；4）用 Western Blot 法檢測缺氧情況下 UCH-L1

3、 對凋亡相關蛋白表達和HIF-1α 表達調控的影響。 結果： 結果： 1）劃痕法和 Matrigel 法結果表明在缺氧環(huán)境下沉默 UCH-L1 后膠質瘤細胞 U251 和 T98G 的遷移能力、侵襲能力明顯下降，提示 UCH-L1 能促進惡性膠質瘤細胞的侵襲和遷移； 2） 臺盼藍、 克隆集落實驗結果表明在缺氧環(huán)境下沉默 UCH-L1后惡性膠質瘤細胞 U251 和 T98G 的存活和增殖能力明顯減弱，提示 UCH-L1 有助于惡性膠質瘤細

4、胞缺氧環(huán)境下的增殖和存活；3）在缺氧環(huán)境下沉默 UCH-L1 后惡性膠質瘤細胞相關凋亡蛋白 Caspase 3、PARP 的表達明顯增加，提示 UCH-L1 能抑制惡性膠質瘤細胞凋亡的發(fā)生；4）在缺氧環(huán)境下沉默 UCH-L1 表達后惡性膠質瘤細胞U251 和 T98G 的乳酸生成量和葡萄糖消耗量明顯減少，提示 UCH-L1 能促進惡性膠質瘤細胞的糖酵解能力；5）在缺氧環(huán)境下沉默 UCH-L1 后惡性膠質瘤細胞 HIF-1α蛋白水平明顯降