人OX40L轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的構(gòu)建與單克隆抗體的研制及其生物學(xué)功能的研究.pdf

1、人OX40配體(OX40L或CD134L)屬TNF超家族成員,為Ⅱ型跨膜糖蛋白,Mr約34~40kD,編碼183個(gè)氨基酸.人OX40L由Miura等于1991年克隆,最初命名為gp34,基因長(zhǎng)約1kb,定位于人染色體1q25.人OX40L具有廣泛的表達(dá)譜,主要表達(dá)于成熟的樹突狀細(xì)胞(DC)、活化的B細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECV)、人臍帶靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)、巨噬細(xì)胞以及心、骨骼肌、睪丸和肺等組織器官.在機(jī)體的免疫應(yīng)答過程中,OX

2、40/OX40L作為一對(duì)重要的共刺激分子,為T、B細(xì)胞的激活提供了重要的共刺激信號(hào).它們的相互作用能促進(jìn)CD4<'+>T細(xì)胞的活化、增殖、遷移并延長(zhǎng)其壽命,能促進(jìn)生發(fā)中心(GC)的形成,還能促進(jìn)DC分化成熟及細(xì)胞粘附.近年研究表明,在腫瘤免疫應(yīng)答的介導(dǎo)和自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展中,OX40/OX40L發(fā)揮了重要作用,且OX40只在炎癥和腫瘤浸潤(rùn)部位的抗原特異性T細(xì)胞上特異高表達(dá),使其成為一個(gè)理想的免疫干預(yù)靶分子.因此,OX40L轉(zhuǎn)基因細(xì)

3、胞的構(gòu)建、OX40L分子的激動(dòng)劑或拮抗劑的研制及其在OX40/OX40L信號(hào)傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)中的作用的研究將在腫瘤、移植排斥反應(yīng)、自身免疫性疾病中具有重要的理論研究和臨床應(yīng)用價(jià)值.綜上所述,該研究成功克隆了人OX40L基因、構(gòu)建了轉(zhuǎn)OX40L的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞并研制了6株能穩(wěn)定分泌特異性鼠抗人OX40L功能性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株.首次證實(shí)所獲的抗人OX40L單抗(9H10和4C12)能通過逆向信號(hào)促進(jìn)T細(xì)胞依賴性B細(xì)胞分泌IgG,而且9H10激