MS-275對(duì)骨肉瘤細(xì)胞RECK基因表達(dá)的影響研究.pdf

1、目的：
　　觀察組蛋白去乙?；敢种苿┒魈嫠舅‥ntinostat，MS-275）對(duì)骨肉瘤細(xì)胞RECK基因表達(dá)的影響。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)骨肉瘤細(xì)胞系 MG-63，并根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆譃榭瞻讓?duì)照組和不同濃度MS-275處理組。其中對(duì)照組僅給予0.1％ DMSO處理；MS-275干預(yù)組采用0.1，1.0，3.0μmol/L MS-275作用MG63細(xì)胞24～72h。采用WST-1法檢測(cè)MS-275處理后MG-6

2、3細(xì)胞的增殖情況。提取細(xì)胞總RNA和蛋白，RT-PCR檢測(cè)RECK mRNA和蛋白的表達(dá)情況。同時(shí)，采用熒光共振能量轉(zhuǎn)移法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-9的酶活性。
　　結(jié)果：
　　1. WST-1結(jié)果顯示，在0.1～3μmol/L濃度范圍內(nèi)，MS-275可顯著抑制MG-63細(xì)胞增殖，其中3μmol/L MS-275對(duì)MG-63細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率達(dá)46%。
　　2. RT-PCR結(jié)果顯示：RECK基因在MG-63細(xì)胞中表達(dá)

3、較低。經(jīng)0.1～3μmol/L MS-275處理后，RECK mRNA水平隨著MS-275濃度的增高而遞增。Western blot結(jié)果也顯示，不同濃度MS-275也能提高M(jìn)G-63細(xì)胞中RECK蛋白的表達(dá)水平。
　　3.酶活性結(jié)果顯示，MG-63細(xì)胞上清液中MMP-9酶活性水平較高，經(jīng)0.1～3μmol/L MS-275處理后，其酶活性隨著濃度的增高而降低。其中3μmol/LMS-275可將其酶活性降低至43%。
　　結(jié)論