γ-亞麻酸生產(chǎn)菌的工藝優(yōu)化及菌種選育.pdf

1、γ-亞麻酸(γ-linolenicacid)是一種人體必需的多不飽和脂肪酸，它以其獨(dú)特的生理機(jī)能日益引起人們的重視。微生物發(fā)酵生產(chǎn)γ-亞麻酸也成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。本文以雅致小克銀漢霉(Cunninghamellaelegants)為研究對(duì)象，從檢測(cè)方法、搖瓶工藝優(yōu)化，菌種初步選育等方面，對(duì)γ-亞麻酸發(fā)酵作了相應(yīng)的研究。
　　 GLA的檢測(cè)需要經(jīng)過(guò)菌體干燥、油脂提取、甲酯衍生化和氣相分析四個(gè)過(guò)程，因而快速、有效的分析方法的建

2、立是十分重要的。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)確定了較好的檢測(cè)條件：菌體干燥的溫度和時(shí)間分別為80℃和16h；油脂提取時(shí)間和水浴溫度分別為12h為75℃；皂化時(shí)間和甲酯化時(shí)間對(duì)衍生化影響最大；氣相分析過(guò)程中柱溫為190℃，分流比為120:1，GLA保留時(shí)間約為9min。
　　 在搖瓶工藝優(yōu)化過(guò)程中，主要考慮了溫度、pH、溶氧、接種、發(fā)酵時(shí)間五個(gè)因數(shù)對(duì)發(fā)酵的影響，并確定了相應(yīng)參數(shù)的最佳條件：溫度為28℃，pH為6，轉(zhuǎn)速為200rpm，裝量為100mL(

3、500mL三角瓶)，種齡為44h，接種量為12％，發(fā)酵時(shí)間為8d。在此基礎(chǔ)上，對(duì)碳源、氮源、植物油、甘油、非離子表面活性劑、檸檬酸(鹽)、微量元素分別進(jìn)行了研究，并通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定了較好的發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖15％，酵母膏1.5％，花生油2.0％，檸檬酸/檸檬酸三鈉(1:1)0.5％，吐溫-200.8％，KH2PO40.3％，NaNO30.5％，MgSO4·7H2O0.05％，GLA的含量為1.49g/L。
　　 經(jīng)過(guò)對(duì)GLA代謝