射波刀治療白血病結(jié)節(jié)的離體細(xì)胞劑量學(xué)研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)離體人慢性髓細(xì)胞性白血病急變期細(xì)胞K562細(xì)胞系進(jìn)行單次不同劑量的照射，比較其在不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞造成的損傷方式以及細(xì)胞對(duì)損傷的修復(fù)機(jī)制和效果，得出輻射對(duì)K562細(xì)胞的劑量.效應(yīng)關(guān)系和時(shí)間.并對(duì)臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)病灶進(jìn)行初步驗(yàn)證和療效觀察。 方法：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期K562細(xì)胞分別給予0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy、10Gy、15Gy、20Gy6MV-X線照射，并于照射后2小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)收集細(xì)胞

2、，采用ANNEXIN-V/PI雙染色法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡百分率變化，PI單染色法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期阻滯情況，并采用MTT比色法和克隆形成法檢測(cè)照射后細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制和活性，綜合以上幾種方法檢測(cè)結(jié)果并以SPSS12.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出不同照射劑量和時(shí)間對(duì)離體白血病細(xì)胞的殺傷作用方式，以及細(xì)胞對(duì)損傷進(jìn)行修復(fù)的能力，最后通過(guò)對(duì)臨床病例療效分析對(duì)所獲實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果進(jìn)行初步驗(yàn)證。 結(jié)果：1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可將輻射劑量大致分為三個(gè)區(qū)間

3、組進(jìn)行比較，分別是低劑量組(1～2Gy)、中等劑量組(3～5Gy)和高劑量組(10～20Gy)： 2、低劑量組細(xì)胞照射后2小時(shí)即出現(xiàn)凋亡，且凋亡率隨劑量增加而增加(p<0.05)，凋亡峰出現(xiàn)在照射后24小時(shí)，此時(shí)出現(xiàn)短暫的S期阻滯，48小時(shí)后凋亡率減少，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，細(xì)胞周期逐漸恢復(fù)，細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制，2周后檢測(cè)克隆形成能力強(qiáng)(85％～93％)； 3、中劑量組細(xì)胞照射后2小時(shí)即出現(xiàn)細(xì)胞周期S期阻滯，24小時(shí)進(jìn)入G2

4、/M期阻滯，48小時(shí)后部分恢復(fù)細(xì)胞增殖周期，期間細(xì)胞凋亡率沒(méi)有明顯變化(p>0.05)，隨劑量增加凋亡率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異但總凋亡率高于低劑量組(p<0.05)，72小時(shí)后細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率增加，2周后克隆形成率低(49％～71％)，p值均小于0.05； 4、高劑量組細(xì)胞照射后2小時(shí)出現(xiàn)短暫的S期阻滯后進(jìn)入持續(xù)的G2/M期阻滯，同時(shí)細(xì)胞凋亡率隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加(p<0.05)，但各劑量點(diǎn)間同一時(shí)間點(diǎn)凋亡率無(wú)明顯差別(p>0.05)，總凋

5、亡率高于中、低劑量組(p<0.05)，72小時(shí)后細(xì)胞生長(zhǎng)明顯被抑制(p<0.01)，2周后檢測(cè)很少或無(wú)克隆形成(0～23％)； 5、臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)6～17Gy/1～3f照射后病灶局部控制率達(dá)到100％，耐受良好，無(wú)明確治療相關(guān)副作用發(fā)生，但受病例數(shù)較少和隨訪時(shí)間不足所限尚未能獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果。 結(jié)論：1、K562細(xì)胞經(jīng)1～2GyX線照射后發(fā)生亞致死性損傷，單次照射后48小時(shí)后可基本恢復(fù)，損傷隨劑量增加