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1、本文旨在研究氧化型低密度脂蛋白對(duì)平滑肌細(xì)胞中核因子-κB激活的影響及金雀異黃素的抑制作用,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。因此,以體外培養(yǎng)的人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞為對(duì)象,采用免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定氧化型低密度脂蛋白和核因子-κB亞單位p65核移位的時(shí)間效應(yīng)與濃度效應(yīng)關(guān)系;選擇50mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用細(xì)胞2h,并且加入不同濃度金雀異黃素對(duì)其進(jìn)行干預(yù);應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)各組平滑肌細(xì)胞中核因子-κB亞單位P65核移位陽(yáng)性率,觀察金雀異黃
2、素對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞中核因子-κB激活的影響;用WesternBlotting法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)κB抑制蛋白-α蛋白含量變化,流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度反映細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生情況,硝酸還原酶法測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮產(chǎn)生的量,對(duì)金雀異黃素影響氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞中核因子-κB激活機(jī)制進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析顯示,氧化型低密度脂蛋白可誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞中核因子-κB-α的激活,其機(jī)制可能與增加細(xì)胞內(nèi)
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