葡萄糖、胰島素及吡格列酮對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的影響.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模后w外觀察葡萄糖、胰島素和吡格列酮對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs)向成骨細(xì)胞分化的影響，探討三者對骨代謝的作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法： 從大鼠長骨骨髓分離獲取間充質(zhì)干細(xì)胞，在不同糖濃度（5.6mM、25mMl、50mM）及胰島素（0.6ug/ml）與吡格列酮（0.1ug/ml）干預(yù)下向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)21天；茜素紅染色、光鏡計(jì)數(shù)礦化率；real time PCR 測定成骨細(xì)胞的標(biāo)記物堿性磷酸酶（ALP）,骨鈣素

2、（BGP）及轉(zhuǎn)錄因子Runx2 mRNA 表達(dá)，進(jìn)行不同糖濃度組間及胰島素和吡格列酮干預(yù)后的變化比較。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)21天后，茜素紅染色結(jié)果顯示，隨著糖濃度升高，礦化率顯著降低，25mM 糖濃度組與對照組（5.6mM）相比礦化率降低了21％，50mM 糖濃度組與對照組（5.6mM）相比礦化率降低了55％，差異均有顯著性（P<0.01）。Real time PCR結(jié)果顯示，隨著糖濃度升高，ALP,BGP 及Run

3、x2 mRNA 表達(dá)顯著降低。25mM 糖濃度組與對照組（5.6mM）相比，ALP,BGP 及Runx2 mRNA 表達(dá)水平分別降低了35％、26％、24％，差異均有顯著性（P<0.01）；50mM 糖濃度組與對照組（5.6mM）相比，ALP、BGP 及Runx2 mRNA 表達(dá)水平也顯著降低（P<0.01）。在三種糖濃度下，茜素紅染色結(jié)果顯示，與沒有加藥物組相比，胰島素干預(yù)組，礦化率明顯提高，分別提高了16％、19％、20％，差異均有

4、顯著性（P<0.05）；吡格列酮干預(yù)組，礦化率明顯降低，分別降低了20％、25％、25％，差異均有顯著性（P<0.05）；吡格列酮和胰島素共同干預(yù)組礦化率接近于未加藥物組，差異無顯著性（P>0.05）。Real time PCR 結(jié)果顯示，在相同糖濃度下，與沒有加藥物組相比，胰島素干預(yù)組ALP,BGP 及Runx2 mRNA 表達(dá)水平顯著升高（P<0.01），吡格列酮干預(yù)組，ALP,BGP 及Runx2 mRNA 表達(dá)水平顯著降低（P<

5、0.01），吡格列酮和胰島素共同干預(yù)組mRNA 表達(dá)水平接近于未加藥物組，差異無顯著性（P>0.05）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 1、高糖能抑制BMSCs 向成骨細(xì)胞分化，可能為糖尿病性骨質(zhì)疏松形成的重要機(jī)制之一。 2、胰島素可促進(jìn)BMSCs 向成骨細(xì)胞分化，并可能改善高糖對BMSCs 分化的抑制作用，可能會(huì)減低糖尿病骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率。 3、吡格列酮能抑制BMSCs 向成骨細(xì)胞分化，它可能通過使BMSCs 向成骨細(xì)