中樞組胺在帕金森病發(fā)病中的作用.pdf

1、迄今為止，帕金森病(Parkinson's disease，PD)病因及發(fā)病機制仍不完全清楚，腦內(nèi)多種神經(jīng)遞質(zhì)的失衡紊亂是多巴胺能神經(jīng)元損傷逐漸加重的重要原因之一。其中腦內(nèi)組胺作為一種神經(jīng)遞質(zhì)(histamine，HA)在PD中的作用日益受到關(guān)注。有研究發(fā)現(xiàn)，PD時腦內(nèi)組胺能系統(tǒng)處于激活狀態(tài)，但其具體意義和機制仍不清楚。 第一部分：中樞組胺介入6-OHDA引起的多巴胺能神經(jīng)元的進行性缺失 目的： 為明確組胺在黑質(zhì)

2、多巴胺能神經(jīng)元進行性缺失中的作用， 方法： 本實驗以6-OHDA毀損右側(cè)黑質(zhì)一紋狀體通路制備大鼠PD模型。制備模型之前和之后，每日給予組胺相關(guān)藥物連續(xù)14日。術(shù)后第1，7，14日，進行阿樸嗎啡誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)行為的檢測，并在相應(yīng)時間點選取部分動物進行黑質(zhì)內(nèi)多巴胺羥化酶(tyrosine hydroxylase，TH)免疫組織化學(xué)的檢測。 結(jié)果： 模型組動物，毀損后1，7，14日出現(xiàn)逐漸增強的旋轉(zhuǎn)行為和逐漸加重的

3、神經(jīng)元缺失。與模型組相比較，組胺前體物質(zhì)組胺酸(500mg/kg，i.p.)可加重旋轉(zhuǎn)行為(day7，27％；day14，26％，p<0.05)和黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元的缺失(day1，67％vs 47％；day7，90.4％vs 74％loSS，p<0.05)。相反，組胺合成酶抑制劑(α-fluoromethylhistidine，α-FMH，25 μg，i.c.v.)可減輕旋轉(zhuǎn)行為(day7，25％；day14，26％，p<0.05)

4、和減少黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元的缺失(day1，28％vs 47％；day7，58％vs74％loss，p<0.05)。此外，與α-FMH相似，組胺H1受體拮抗劑Pyrilamine(5 μg，i.c.v.)也可可減輕旋轉(zhuǎn)行為(day7，38％；day14，21％，p<0.05)和減少黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元的缺失(day1，38％vs 51％；day7，60％vs 78％loss，p<0.05)：但組胺H2受體拮抗劑Cimitidine(5μ

5、g，i.c.v.)則無此作用。毀損晚期(第14日)，TH免疫組化顯示所有處理組大鼠黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元幾乎完全缺失，故無組間差異存在。結(jié)論：PD形成早期，腦內(nèi)組胺具有加重6-OHDA引起的PD大鼠黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元缺失的作用，該作用是通過H1受體介導(dǎo)的；反之，如果降低腦內(nèi)組胺的傳遞則有保護多巴胺能神經(jīng)元的作用。 第二部分：組胺能配體對阿樸嗎啡誘導(dǎo)的帕金森病大鼠旋轉(zhuǎn)行為的修飾 目的： 為明確組胺及其受體在基底結(jié)神

6、經(jīng)回路中的作用， 方法： 仍應(yīng)用6-OHDA偏側(cè)毀損模型，分別于術(shù)后第7和14日在注射阿樸嗎啡前一次性給予組胺能配體，之后記錄1小時內(nèi)各組動物的旋轉(zhuǎn)次數(shù)。 結(jié)果： 與模型組相比較，一次性給予組胺前體物質(zhì)組胺酸(500mg/kg，i.p.)可增加而組胺合成酶抑制劑α-FMH(25 μg，i.c.v.)可降低PD大鼠的旋轉(zhuǎn)行為；組胺H1受體拮抗劑Pyrilamine(50μg，i.c.v.)，H2受體拮抗劑C

7、imetidine(50 μg，i.c.V.)及H3受體激動劑immepip(10 μg，i.c.v.)也降低了該旋轉(zhuǎn)行為，而H3受體拮抗劑Clobenpropit(10 μg，i.c.v.)對旋轉(zhuǎn)行為則無明顯影響。 結(jié)論：內(nèi)源性組胺可通過H1，H2和H3受體以一種復(fù)雜的方式修飾基底節(jié)神經(jīng)回路。 第三部分組胺脫羧酶mRNA在帕金森病病人下丘腦結(jié)節(jié)乳頭核的表達 目的： 為明確PD時腦內(nèi)組胺的增加是否由組胺合

8、成增多所致， 方法： 本實驗選取11個PD病人及其相匹配的11對照病人，應(yīng)用放射性同位素標記的原位雜交技術(shù)檢測下丘腦結(jié)節(jié)乳頭核(tuberomammillary nucleus，TMN)內(nèi)組胺脫羧酶(histidine decarboxylase，HDC)mRNA的表達。 結(jié)果：對照組病人TMN內(nèi)HDC mRNA總含量平均為6821±863 a.u.(n=11)；與對照組相比較，PD組病人HDCmRNA總含量較對