納米銀局部給藥治療脊柱化膿性感染的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一章兔脊柱化膿性感染模型的建立
　　 目的：建立兔脊柱化膿性感染模型。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：取雄性新西蘭大白兔12只，隨機(jī)分為4組，分別給予濃度103CFU/ml、102CFU/ml、10CFU/ml的金黃色葡萄球菌懸液及生理鹽水。手術(shù)入路選擇前外側(cè)腹膜后入路，術(shù)中暴露出兔脊柱L1/2、L5/6椎間隙，切除大部分椎間盤，然后將不同濃度金黃色葡萄球菌懸浮液種植于椎間隙。術(shù)后2周抽靜脈血培養(yǎng)并處死動(dòng)物，取手術(shù)部位骨組織、肝臟做

2、細(xì)菌培養(yǎng)，并取手術(shù)部位骨組織行組織學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：應(yīng)用濃度102CFU/ml(接種細(xì)菌數(shù)量為102CFU/ml×0.1ml)的金黃色葡萄球菌懸液成功的在100％(8/8)的種植部位誘導(dǎo)出脊柱感染，肝臟及血培養(yǎng)結(jié)果為陰性，排除全身系統(tǒng)性感染的可能。濃度10CFU/ml(接種細(xì)菌數(shù)量為10CFU/ml×0.1ml)的金黃色葡萄球菌懸液在33％(2/6)的種植部位誘導(dǎo)出脊柱感染。濃度103CFU/ml(接種細(xì)菌數(shù)量為103CFU

3、/ml×0.1ml)的金黃色葡萄球菌懸液在100％(6/6)的種植部位誘導(dǎo)出脊柱感染，但有2只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于術(shù)后7天、11天死亡。
　　 結(jié)論：成功的建立了合適的兔脊柱化膿性感染模型，這種模型可應(yīng)用于脊柱化膿性感染不同治療手段干預(yù)的療效比較。
　　 第二章納米銀局部保留注射治療兔脊柱感染的療效觀察
　　 目的：探討應(yīng)用納米銀對(duì)脊柱化膿性感染的治療效果。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：取新西蘭大白兔24只，隨機(jī)分為空白對(duì)

4、照組、實(shí)驗(yàn)組A、實(shí)驗(yàn)組B，按前述方法制作脊柱感染模型，同時(shí)術(shù)中在手術(shù)部位留置導(dǎo)藥管。術(shù)后第一日開(kāi)始每日局部給藥，實(shí)驗(yàn)組A給予0.1mg/Kg納米銀溶液，實(shí)驗(yàn)組B給予1mg/Kg納米銀溶液，空白對(duì)照組給予生理鹽水。連續(xù)給藥2周后抽靜脈血做培養(yǎng)并處死動(dòng)物，取手術(shù)部位骨組織行組織學(xué)檢查及培養(yǎng)，另取肝臟組織做培養(yǎng)。處死動(dòng)物前行脊柱X線、CT檢查，觀察影像學(xué)變化。
　　 結(jié)果：接種部位骨組織細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果示實(shí)驗(yàn)組A感染陽(yáng)性率75％(6/8)

5、，0死亡；實(shí)驗(yàn)組B感染陽(yáng)性率25％(2/8)，0死亡；空白對(duì)照組感染陽(yáng)性率100％，1例死亡，2例雙下肢癱瘓。實(shí)驗(yàn)組B與空白對(duì)照組感染陽(yáng)性率結(jié)果比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，實(shí)驗(yàn)組A與空白對(duì)照組感染陽(yáng)性率結(jié)果比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，證實(shí)了納米銀局部保留給藥的有效性。X線、CT檢查示感染動(dòng)物細(xì)菌接種局部有骨質(zhì)破壞、骨密度增高、椎間隙狹窄等表現(xiàn)，未感染動(dòng)物沒(méi)有發(fā)現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)變化。相應(yīng)病檢結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)影像學(xué)及培養(yǎng)陽(yáng)性的動(dòng)物椎體骨

6、組織發(fā)生典型化膿性骨髓炎改變，骨髓組織溶解壞死，骨髓腔有化膿性滲出物和壞死物質(zhì)，骨細(xì)胞大量壞死，成骨活性減低，死骨形成，周圍有炎性肉芽組織。
　　 結(jié)論：局部應(yīng)用納米銀溶液治療脊柱化膿性感染是有效的，納米銀溶液在體內(nèi)內(nèi)環(huán)境中的抗菌作用與給藥濃度呈正相關(guān)。但納米銀局部給藥治療脊柱感染的作用不是決定性的，不能證實(shí)這種治療方式可以完全替代全身應(yīng)用抗生素。
　　 第三章納米銀在動(dòng)物體內(nèi)的生物學(xué)分布
　　 目的：初步分析納

7、米銀在動(dòng)物體內(nèi)分布情況。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：取實(shí)驗(yàn)第二部分的動(dòng)物靜脈血清、肝、腎、脾、脊髓、睪丸器官標(biāo)本，分組同實(shí)驗(yàn)第二部分，設(shè)為0.1mg/Kg組、1mg/Kg組、空白對(duì)照組。采用硝酸.高氯酸化學(xué)消化法，將待測(cè)標(biāo)本消化為液態(tài)，用原子吸收法測(cè)定組織中銀的含量。制作肝、腎、脾、脊髓、睪丸石蠟切片標(biāo)本做組織學(xué)檢查，觀察有無(wú)病理變化，制作脊髓超薄切片，行透視電鏡觀察。
　　 結(jié)果：1mg/Kg納米銀溶液組測(cè)得各組織銀含量順序脊髓

8、>脾>腎>睪丸>肝>血清，0.1mg/kg納米銀組各組織銀含量順序?yàn)榧顾?腎>脾>肝>睪丸>血清。兩實(shí)驗(yàn)組血清銀含量與對(duì)照組比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩實(shí)驗(yàn)組脊髓組織銀含量與對(duì)照組比較，均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；1mg/Kg實(shí)驗(yàn)組肝、腎、脾、睪丸銀含量與對(duì)照組比較，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；0.1mg/Kg實(shí)驗(yàn)組肝、腎、脾、睪丸銀含量與對(duì)照組比較，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果表明1mg/Kg

9、納米銀組除血清外，在脊髓、肝、腎、脾、睪丸組織均產(chǎn)生了蓄積，0.1mg/Kg納米銀組僅在脊髓組織產(chǎn)生了蓄積。兩實(shí)驗(yàn)組脊髓、肝、腎、脾、睪丸組織學(xué)檢查均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著病理改變。
　　 結(jié)論：納米銀溶液通過(guò)局部保留給藥的方式，是安全有效的，但當(dāng)給藥量達(dá)到一定限值后，會(huì)在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生蓄積，其蓄積的過(guò)程主要通過(guò)血淋巴系統(tǒng)的轉(zhuǎn)運(yùn)和局部直接轉(zhuǎn)移完成，蓄積作用最明顯的靶組織為周圍組織(脊髓)及免疫器官(脾)，微量的蓄積不會(huì)導(dǎo)致組織器官的器質(zhì)性和