復方黃黛對NB-,4-細胞生長抑制和促調亡作用的研究.pdf

1、目的：研究納米雄黃、青黛、復方黃黛對急性早幼粒細胞白血病(APL)細胞株NB4細胞的生長抑制和促凋亡作用，從而為進一步研究復方黃黛治療APL的作用機制及其主要有效成分提供佐證。 方法：本實驗將通過對復方黃黛拆方研究，以APL細胞株NB4細胞為體外模型，實驗組別為四組：空白對照組、納米雄黃組、青黛組、復方黃黛組。實驗分為兩部分：(1)四噻唑藍(MTT)法檢測藥物處理NB4細胞后，細胞的生長抑制情況：首先分別應用終濃度為0.1875

2、～12mg·L-1納米雄黃、0.235～15.04mg·L-1青黛、0.656～42mg·L-1復方黃黛處理NB4細胞24小時后，應用MTT法檢測細胞生長抑制情況，并以藥物濃度對數(shù)值對抑制率作線性回歸，得直線方程，從中求出藥物的半數(shù)抑制濃度(IC50)，并將三個實驗組的生長抑制率進行比較； 再分別應用終濃度為1.5mg·L-1納米雄黃、1.88mg·L-1青黛、5.25mg·L-1復方黃黛處理NB4細胞，分別在用藥后6小時、12

3、小時、24小時、48小時、72小時用MTT檢測細胞生長抑制情況，并將作用不同時間的三個實驗組細胞的生長抑制率進行比較。利用單因素方差分析(ANOVA)統(tǒng)計各組間是否具有顯著性差異。 (2)光學顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察藥物處理NB4細胞后，細胞的形態(tài)學變化：分別應用終濃度為1.5mg·L-1納米雄黃、1.88mg·L-1青黛、5.25mg·L-1復方黃黛處理NB4細胞24小時后，用瑞士—吉姆薩染色、HE染色和透射電鏡觀察NB4細

4、胞形態(tài)學改變。 結果：(1)MTT法檢測NB4細胞的生長抑制情況：0.1875～12mg·L-1納米雄黃、0.235～15.04mg·L-1青黛、0.656～42mg·L-1復方黃黛處理NB4細胞24小時后，發(fā)現(xiàn)在這一濃度范圍內，抑制程度隨著藥物濃度的增大而逐漸增強。其中，納米雄黃的IC50為8.683mg·L-1，青黛的IC50為3818.172mg·L-1，復方黃黛的IC50為5.203mg·L-1。 (2)光學顯微

5、鏡和透射電子顯微鏡觀察NB4細胞的形態(tài)學變化：瑞士—吉姆薩染色及HE染色光鏡下觀察，可見納米雄黃組、青黛組、復方黃黛組處理NB4細胞中出現(xiàn)凋亡細胞，細胞皺縮呈圓形或呈新月形。 結論：(1)納米雄黃、青黛、復方黃黛對急性早幼粒細胞白血病(APL)細胞株NB4細胞的生長抑制作用與時間、濃度呈正相關性；在復方黃黛中主要是納米雄黃抑制APL細胞株NB4細胞的增殖，青黛抑制APL細胞株NB4細胞增殖的作用極小，但納米雄黃和青黛對NB4細胞