青蒿琥酯納米脂質體抗肝癌作用及其線粒體途徑誘導凋亡機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:對比研究ART納米脂質體與ART原料藥在體外培養(yǎng)肝癌細胞和人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型中的抗肝癌作用,及對凋亡基因表達的影響。為肝癌的臨床治療探索新的安全有效的藥物制劑。
  方法:制備ART納米脂質體;MTT法檢測其對體外肝癌細胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258染色法觀察細胞凋亡的形態(tài)學改變;建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,觀察ART納米脂質體的抑瘤作用;應用 RT-PCR法檢測藥物處理后細胞和組織中凋亡因子 Apaf

2、-1、caspase-9、caspase-3 mRNA的表達;免疫組織化學法檢測凋亡因子caspase-3蛋白的表達。
  結果:MTT方法檢測 HepG2細胞的生長抑制情況,結果顯示ART原料藥和ART納米脂質體對HepG2細胞的生長抑制作用呈劑量和時間依賴性,作用48h時,ART原料藥組和ART納米脂質體組隨藥物濃度的不斷增加(12.5、25、50、100、200μg/ml),細胞生長抑制率不斷增強,當藥物濃度為50μg/ml

3、時,ART原料藥的抑制率為85%,ART納米脂質體的抑制率為90%,而順鉑在50μg/ml時的抑制率為72%,72h后ART納米脂質體組細胞生長抑制率明顯強于原料藥組,且差異顯著。ART納米脂質體的 IC50為15.997μg/ml,ART原料藥的IC50為19.706μg/ml;對正常肝細胞L-o2細胞的作用,ART納米脂質體的 IC50為100.226μg/ml, ART原料藥的 IC50為105.54μg/ml;Hoechst33

4、258染色HepG2細胞發(fā)生凋亡形態(tài)學改變;人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,三個處理組瘤重分別為對照組0.859±0.207g,ART原料藥組為0.682±0.240g,ART納米脂質體組0.578±0.185g。ART原料藥的抑瘤率為20.5%,ART納米脂質體的抑瘤率為32.7%,ART脂質體對腫瘤的抑制作用明顯高于ART原料藥;RT-PCR技術檢測細胞和組織中凋亡相關因子 mRNA表達,ART納米脂質體組與原料藥組的Apaf-1、cas

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