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文檔簡介
1、目的:對比研究ART納米脂質體與ART原料藥在體外培養(yǎng)肝癌細胞和人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型中的抗肝癌作用,及對凋亡基因表達的影響。為肝癌的臨床治療探索新的安全有效的藥物制劑。
方法:制備ART納米脂質體;MTT法檢測其對體外肝癌細胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258染色法觀察細胞凋亡的形態(tài)學改變;建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,觀察ART納米脂質體的抑瘤作用;應用 RT-PCR法檢測藥物處理后細胞和組織中凋亡因子 Apaf
2、-1、caspase-9、caspase-3 mRNA的表達;免疫組織化學法檢測凋亡因子caspase-3蛋白的表達。
結果:MTT方法檢測 HepG2細胞的生長抑制情況,結果顯示ART原料藥和ART納米脂質體對HepG2細胞的生長抑制作用呈劑量和時間依賴性,作用48h時,ART原料藥組和ART納米脂質體組隨藥物濃度的不斷增加(12.5、25、50、100、200μg/ml),細胞生長抑制率不斷增強,當藥物濃度為50μg/ml
3、時,ART原料藥的抑制率為85%,ART納米脂質體的抑制率為90%,而順鉑在50μg/ml時的抑制率為72%,72h后ART納米脂質體組細胞生長抑制率明顯強于原料藥組,且差異顯著。ART納米脂質體的 IC50為15.997μg/ml,ART原料藥的IC50為19.706μg/ml;對正常肝細胞L-o2細胞的作用,ART納米脂質體的 IC50為100.226μg/ml, ART原料藥的 IC50為105.54μg/ml;Hoechst33
4、258染色HepG2細胞發(fā)生凋亡形態(tài)學改變;人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,三個處理組瘤重分別為對照組0.859±0.207g,ART原料藥組為0.682±0.240g,ART納米脂質體組0.578±0.185g。ART原料藥的抑瘤率為20.5%,ART納米脂質體的抑瘤率為32.7%,ART脂質體對腫瘤的抑制作用明顯高于ART原料藥;RT-PCR技術檢測細胞和組織中凋亡相關因子 mRNA表達,ART納米脂質體組與原料藥組的Apaf-1、cas
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