尼美舒利對(duì)氯化鈷誘導(dǎo)的人胃癌細(xì)胞HIF-1a、VEGF表達(dá)的抑制作用和機(jī)制研究.pdf

1、鄭州大學(xué)博士學(xué)位論文尼美舒利對(duì)氯化鈷誘導(dǎo)的人胃癌細(xì)胞HIF1a、VEGF表達(dá)的抑制作用和機(jī)制研究姓名：馮玉光申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化）指導(dǎo)教師：李建生20050510型＆絲!堂堂堅(jiān)絲星簍捌幽塑墜宣幽墮墅：!!：坐塑!塑堂幽型墮豎能是體內(nèi)腫瘤COX。2常與VEGF共表達(dá)的重要原因之一。前列腺素E2(prostaglandinE2，PGE2)是COX2催化反應(yīng)的主要終產(chǎn)物之一，是血管生成的刺激因子，在多種細(xì)胞類型PGE2增自HV

2、EGF表達(dá)。推測(cè)低氧誘導(dǎo)的COX一2、PGE2表達(dá)升高參與了低氧誘導(dǎo)的血管生成。COX2抑制劑抑制腫瘤VEGF表達(dá)及血管生成以及PGE2誘導(dǎo)VEGF表達(dá)的確切機(jī)制尚不完全清楚。最近有學(xué)者在前列腺癌細(xì)胞株和結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的研究表明COX一2的主要代謝產(chǎn)物PGE2通過(guò)相應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)H1F1a蛋白水平升高，進(jìn)而促進(jìn)VEGF表達(dá)，提示在體內(nèi)腫瘤低氧微環(huán)境Tcox一2抑制刺可能通過(guò)抑制PGE2的產(chǎn)牛抑制腫l富HIF1、ⅦGF表達(dá)和血管生成。

3、但是，在不同的細(xì)胞系，也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)cOx一2一PGE2：途徑與H1F1ⅡVEGF途徑之間無(wú)關(guān)，提示信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)是復(fù)雜的，在不同的細(xì)胞類型之間存在差異性。鑒于體內(nèi)腫瘤存在低氧區(qū)以及低氧誘導(dǎo)HIF一1a和VEGF表達(dá)是腫瘤血管生成的重要原因，COX一2及其催化產(chǎn)物PGE2在腫瘤血管生成中也發(fā)揮重要作用，有必要進(jìn)～步研究低氧情況下COX一2PGE2信號(hào)途徑與HIF1Ⅱ及VEGF信號(hào)途徑之間的關(guān)系。木研究擬探討選擇性COX一2抑制劑尼美舒利

4、對(duì)低氧模擬劑氯化鈷誘導(dǎo)的人胃腺癌BGC一823細(xì)胞表達(dá)HIF1a、VEGF的抑制作用，闡明COX一2及其主要催化產(chǎn)物PGE2在這種作用中扮演的角色，并進(jìn)一步分別應(yīng)用促細(xì)胞分裂原活化蛋白激酶(MitogenActivatedProteinKinase，MAPK)阻滯劑PD98059和磷酸肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase，P13K)阻滯荊wortmannin研究PGE2i5秀導(dǎo)H1F一1a、VEGF表達(dá)的信

5、號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。研究分為以下三部分：第一部分低氧模擬劑氯化鈷誘導(dǎo)人胃腺癌BGC一823細(xì)胞COX一2、HlF一1n、VEGF表達(dá)的研究方法1細(xì)胞培養(yǎng)及低氧誘導(dǎo)和實(shí)驗(yàn)分組細(xì)胞生長(zhǎng)至60％～70％融合度后，01％FCS的RPMl1640培養(yǎng)基行細(xì)胞同步化24h后，分別加入含或不含低氧模擬劑氯化鈷(150HM1的0I％FCSRPMI1640培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)3、12、24h后收集細(xì)胞。2總RNA提取和RTPCR檢測(cè)氯化鈷對(duì)BGC一823細(xì)胞COX一