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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究鉛暴露對(duì)SH—SY5Y細(xì)胞APP、DNMT1基因表達(dá)和總甲基化水平的影響
方法:
1 培養(yǎng)SH—SY5Y細(xì)胞,并將其暴露于不同濃度的醋酸鉛溶液中,用MTT法檢測(cè)不同劑量的醋酸鉛對(duì)SH—SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的影響。
2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)暴露于不同濃度的醋酸鉛溶液中的SH—SY5Y細(xì)胞,在分化過程中APP和DNMT1基因的mRNA表達(dá)水平。
3 根據(jù)D
2、NA提取試劑盒操作說明提取SH—SY5Y細(xì)胞的基因組DNA。然后使用DNA總甲基化檢測(cè)試劑盒進(jìn)行DNA總甲基化的檢測(cè)。
結(jié)果:
1 隨著培養(yǎng)基中鉛濃度的增加,各組細(xì)胞MTT值隨之減少。醋酸鉛濃度為50μmol/l時(shí),鉛對(duì)SH—SY5Y細(xì)胞增值有抑制的作用。
2和對(duì)照組相比,50μmol/l濃度的鉛刺激下,APP mRNA變化倍數(shù)為1.09,上調(diào)了9%;DNMT1 mRNA變化倍數(shù)為0.91,下降
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