

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、植物在生長發(fā)育過程中經(jīng)常受到生物和非生物脅迫因素的影響,為了適應(yīng)逆境條件,植物已經(jīng)進化出一套復(fù)雜的、綜合的調(diào)控系統(tǒng),在此系統(tǒng)中WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族起著重要的調(diào)節(jié)作用,其中包括調(diào)控脅迫相關(guān)基因的表達來應(yīng)對外界不良環(huán)境。WRKY轉(zhuǎn)錄因子具有多種生物學(xué)功能,是植物特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,對植物的逆境脅迫應(yīng)答反應(yīng)、生長發(fā)育和形態(tài)建成等生理過程起著重要的作用。目前在擬南芥、水稻、大豆和小麥等植物中,WRKY轉(zhuǎn)錄因子與植物生物脅迫研究取得了重要的進展,
2、然而在煙草中與逆境脅迫相關(guān)的WRKY轉(zhuǎn)錄因子研究報道較少。本研究克隆了煙草中的一個WRKY家族成員,并對該基因進行了生物信息學(xué)分析和表達模式分析。主要研究如下:
(1)利用同源性克隆方法,從野生煙草NaWRKY6同源克隆NtWRKY6基因,通過生物信息學(xué)分析,表明該基因的編碼區(qū)長度為1647bp,編碼548個氨基酸,有2個WRKY結(jié)構(gòu)域,屬于第Ⅰ類WRKY蛋白。與辣椒、番茄的WRKY基因序列同源性87%以上。同源性分析表明克隆
3、的基因與擬南芥轉(zhuǎn)錄因子基因AtWRKY6有較高的同源性,與NtWRKY1序列同源性為97%,因此我們推測其可能為NtWRKY6。
(2)構(gòu)建NtWRKY6基因的pGBKT7載體,轉(zhuǎn)化酵母菌株AH109,結(jié)果表明該轉(zhuǎn)錄因子具有轉(zhuǎn)錄激活活性。
(3)通過半定量RT-PCR對NtWRKY6基因進行非生物脅迫響應(yīng)的情況分析表明:在低鉀脅迫下,3h內(nèi)Nt WRKY6的表達量高,3h后表達量開始降低,12h后表達量趨于穩(wěn)定。說明
4、NtWRKY6能響應(yīng)低鉀脅迫;NtWRKY6在低磷處理12h后表達量增加,24h表達量更高,說明NtWRKY6在低磷脅迫下被誘導(dǎo)表達;NtWRKY6在鹽脅迫3h后表達量增加,12h后達到穩(wěn)定水平,說明NtWRKY6受鹽脅迫的誘導(dǎo);在10%PEG模擬干旱脅迫處理下,NtWRKY6在0~24h表達量差異不顯著。
(4)構(gòu)建NtWRKY6-pBI121過表達載體,將其轉(zhuǎn)入到農(nóng)桿菌LBA4404中,通過菌落PCR鑒定陽性克隆。采用葉盤
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 煙草NtWRKY4和NtWRKY9的基因功能分析.pdf
- 煙草NtCIPK23基因的克隆、表達分析及轉(zhuǎn)基因過量表達研究.pdf
- 煙草受激素誘導(dǎo)和逆境脅迫相關(guān)基因的克隆與表達分析.pdf
- 水稻Bel基因的克隆、表達特性分析及對煙草的轉(zhuǎn)化.pdf
- 煙草中NAC類轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與分析.pdf
- 煙草腋芽發(fā)育相關(guān)基因的克隆與功能分析.pdf
- 煙草節(jié)桿菌02181肌酸酶基因的克隆與表達研究.pdf
- 煙草抗生物和非生物脅迫相關(guān)基因的克隆、表達與功能分析.pdf
- 青花椒雄蕊調(diào)控基因zapi的克隆、鑒定與表達模式分析
- 小麥WOX基因的克隆與表達分析.pdf
- 煙草茄尼醇合成途徑中dxps基因的克隆與表達.pdf
- 洋蔥LFY同源基因的克隆與表達分析.pdf
- 水蕨centrin基因的克隆表達與分析.pdf
- 梅AGAMOUS(AG)基因的克隆與表達分析.pdf
- 煙草根特異表達基因的篩選鑒定與啟動子的克隆.pdf
- 臍橙鈣調(diào)蛋白基因(CsCAB)的克隆、表達分析及轉(zhuǎn)化煙草的研究.pdf
- 蓮藕sss基因的克隆與表達特性分析
- 小菜蛾卵黃原蛋白基因的克隆、表達模式與功能分析
- 菜粉蝶絲氨酸蛋白酶基因克隆與表達模式分析.pdf
- 豬母源效應(yīng)基因PADI6的分離克隆、表達模式與調(diào)控機理的研究.pdf
評論
0/150
提交評論