雌二醇代謝產物對肝星狀細胞增殖和TGF-β1、CTGF表達的影響.pdf

1、研究背景：肝纖維化是慢性肝病的共同病理特征，是肝硬化的前期表現(xiàn)，嚴重威脅著人類的身體健康，目前尚無有效的治療方法。肝纖維化的主要表現(xiàn)為細胞外基質過度沉積，常伴隨著肝星狀細胞的活化和增殖。轉化生長因子-β1(TGF-β1)被認為是最強的致纖維化細胞因子，TGF-β1及其下游信號分子結締組織生長因子(CTGF)在調控肝纖維化的過程中起著重要的作用。 臨床流行病學資料顯示肝硬化及其并發(fā)癥存在性別差異。在肝纖維化的細胞模型和動物模型也證

2、實雌激素具有抗肝纖維化的作用。雌激素通常是通過雌激素和雌激素受體(ER)的相互作用發(fā)揮重要的生理功能，過量長期使用也將產生相應的副作用。近來有研究證明雌二醇代謝產物具有抑制內皮細胞的增殖和抗氧化作用，具有一定的心、腎保護作用，推測雌激素抗肝纖維化的作用也有可能是通過代謝產物發(fā)揮的。國內外的學者已經證實，雌二醇代謝產物不能與ER結合，對生物體不會產生雌性化效應，故適用于男女性患者，可以避免雌二醇雌性化的副作用，因此在疾病防治方面有其更廣泛

3、的應用前景。 研究目的：研究雌二醇代謝產物：2-羥雌二醇(2OHE)、2-甲氧雌二醇(2MeOE)、4-羥雌二醇(40HE)對人肝星狀細胞(LX-2)增殖、對轉化生長因子β1(TGF-β1)及結締組織生長因子(CTGF)表達的影響，進一步探討雌二醇代謝產物抗肝纖維化的作用機制，為雌二醇代謝產物臨床治療肝纖維化提供理論基礎。 研究方法：人肝星狀細胞(LX-2)隨機分為13組，分別加入三種不同濃度(10-9M，10-8M，1

4、0-7M)的雌二醇(E2)、雌二醇代謝產物(2OHE，40HE，2MeOE)，并設陽性對照組。孵育48h后，檢測以下指標：1)MTT法檢測雌二醇及代謝產物對LX-2增殖的影響；2)采用RT-PCR技術方法檢測細胞因子TGF-β1、CTGFmRNA的表達；3)采用細胞免疫化學法檢測細胞因子TGF-β1、CTGF蛋白的表達，以明確雌二醇代謝產物抗肝纖維化的作用機理。 研究結果： 1)藥物濃度在10-9M～10-7M的作用下，雌二醇代

5、謝產物具有抑制LX-2增殖的作用，并成劑量依賴關系(P=0.000)；在同一藥物濃度干預下，雌二醇代謝產物與E2組相比，差別有顯著性(P<0.05)，其中2MeOE組的生物學活性最強(P<0.01)，但2OHE組和40HE組比較無顯著性差異(P>0.05)。2)藥物濃度在10-9M～10-7M的作用下，雌二醇代謝產物能抑制細胞因子TGF-β1、CTGFmRNA的表達，并成劑量依賴關系(P=0.000)：在同一藥物濃度干預下，雌二醇代謝產

6、物與E2組相比，差別顯著(P<0.05)，2MeOE組的生物學活性最強(P<0.05)，但20HE組和40HE組無顯著性差異(P>0.05)。3)藥物濃度在10-7M的作用下，各實驗組的TGFβ1、CTGF的蛋白表達均下降，2MeOE的生物學活性最強(P<0.05)，但20HE組和40HE組比較無統(tǒng)計學差異。 研究結論： 1)雌二醇代謝產物對HSCs的增殖具有抑制作用。2)雌二醇代謝產物可以抑制HSCsTGF-β1及其下游信號C