17β雌二醇對高糖誘導(dǎo)的mVSMCs CTGF的表達(dá)影響.pdf

1、第一章高糖促進(jìn)小鼠血管平滑肌細(xì)胞CTGF的表達(dá)
　　 目的：本部分探討高糖對小鼠血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor, CTGF)的表達(dá)影響。
　　 方法：小鼠VSMCs復(fù)蘇傳代后用正常濃度葡萄糖組(NG組,5.5mmol/L葡萄糖)、甘露醇高滲對照組(5.5mmol/L葡萄糖+19.5mm

2、ol/L甘露醇)、高濃度葡萄糖組(HG組,25mmol/L葡萄糖)分別培養(yǎng)小鼠血管平滑肌細(xì)胞0、6、12、24、48小時和0、12、24、48、72小時,應(yīng)用Real-Time PCR和Western Blot觀察其CTGF mRNA及蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：Real-Time PCR顯示：與正常濃度葡萄糖組相比,高糖組明顯上調(diào)VSMCs CTGF mRNA表達(dá),高糖處理后6小時其表達(dá)水平達(dá)高峰,24小時開始下降,48小時

3、候后回落至基礎(chǔ)水平,甘露醇高滲對照組較正常濃度葡萄糖組相比,CTGF mRNA的表達(dá)無明顯差異。Western Blot示：與正常濃度葡萄糖組相比,高糖處理后12小時CTGF蛋白的表達(dá)水平明顯增加,24小時達(dá)高峰,72小時候回落至基礎(chǔ)水平。
　　 結(jié)論：高糖上調(diào)小鼠血管平滑肌細(xì)胞結(jié)締組織生長因子的表達(dá)。
　　 第二章17β雌二醇對高糖誘導(dǎo)的mVSMCs CTGF的表達(dá)影響
　　 目的:從第一章的研究發(fā)現(xiàn)高糖上調(diào)m

4、VSMCs CTGF的表達(dá)。本部分旨在探討17β雌二醇對高糖誘導(dǎo)的mVSMCs CTGF的表達(dá)影響。
　　 方法:分別用培養(yǎng)基含D-葡萄5.5 mmol/L，培養(yǎng)基含D-葡萄25mmol/L+終濃度分別為:0nM、0.01nM、1nM、100nM、1000nM17β雌二醇共6組細(xì)胞分別培養(yǎng)12小時、24小時，利用Real-Time PCR和Western Blot觀察其干預(yù)后CTGF mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。
　　

5、結(jié)果: Real-Time PCR結(jié)果顯示:與正常對照組相比，含不同濃度17β雌二醇的高糖組均促進(jìn)mVSMCs CTGFmRNA的表達(dá)(P＜0.05);與不含17β雌二醇組相比，終濃度分別為0.01nM、1nM、100nM、1000nM17β雌二醇組上調(diào)CTGF的表達(dá)無顯著差異性。
　　 Western Blot結(jié)果顯示:高糖組中，與不含17β雌二醇組相比，0.01nM、1nM、100nM、1000nM17β雌二醇組的CTGF蛋