Orexin及其受體變化在老年大鼠全麻覺(jué)醒延遲中的機(jī)制研究.pdf

1、隨著我國(guó)逐漸步入老年社會(huì)，越來(lái)越多的老年病人正在接受醫(yī)療系統(tǒng)服務(wù)，在未來(lái)這一趨勢(shì)將逐年增加。通過(guò)臨床觀察，我們發(fā)現(xiàn)老年病人在全麻覺(jué)醒階段較青年人顯著延長(zhǎng)。有觀點(diǎn)認(rèn)為：隨著年齡的增長(zhǎng)老齡人群出現(xiàn)多器官系統(tǒng)整體生理功能減低并伴隨慢性疾病，正是這種內(nèi)環(huán)境的改變使機(jī)體藥物代謝率減慢從而影響麻醉覺(jué)醒時(shí)間，然而對(duì)于依賴機(jī)體藥物代謝較小的吸入麻醉藥物這一現(xiàn)象依然存在[1]。在臨床實(shí)踐中處理吸入麻醉藥物引起的老年病人蘇醒延遲這一問(wèn)題時(shí)，目前麻醉醫(yī)生除了

2、依靠機(jī)械換氣，改變體內(nèi)藥物濃度，目前還沒(méi)有可靠干預(yù)辦法[2]。是何種機(jī)制影響麻醉覺(jué)醒，如何從分子生物學(xué)角度對(duì)不同年齡人群麻醉覺(jué)醒進(jìn)行合理解釋，成為早期預(yù)防及處理該現(xiàn)象發(fā)生一種有效方法。
　　經(jīng)典的全身麻醉是由吸入麻醉藥物引起的行為和生理現(xiàn)象產(chǎn)生-神志不清，健忘，和運(yùn)動(dòng)不能與心血管，呼吸和體溫調(diào)節(jié)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。通過(guò)使用動(dòng)態(tài)腦電圖描記方法記錄全身麻醉、睡眠、比較兩種腦電圖表現(xiàn)并不完全相同，全身麻醉過(guò)程中出現(xiàn)腦電“寂靜”于淺昏迷相似，但

3、兩種腦電表現(xiàn)在覺(jué)醒階段卻具有一致性且極為相似[3]。
　　下丘腦腹外側(cè)區(qū)具有日周期節(jié)律活動(dòng)，這一區(qū)域是體內(nèi)日周期節(jié)律活動(dòng)的控制中心在整個(gè)睡眠覺(jué)醒調(diào)節(jié)機(jī)制中這一調(diào)節(jié)作用呈“網(wǎng)狀”[4]。1998年日本學(xué)者Yanigasawa領(lǐng)導(dǎo)的研究小組發(fā)現(xiàn)的一種新型的神經(jīng)肽Orexin，orexin位于下丘腦腹外側(cè)區(qū)，orexin不僅有能促進(jìn)控制攝食行為的作用，同時(shí)參與覺(jué)醒周期、能量代謝、以及對(duì)心血管及自主神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)[5]。目前研究認(rèn)為ore

4、xin在睡眠-覺(jué)醒機(jī)制中起著重要作用，隨著研究的深入人們發(fā)現(xiàn)orexin可以明顯減少吸入麻醉藥物的麻醉時(shí)間使麻醉大鼠腦電圖出現(xiàn)‘覺(jué)醒’樣改變[6]。但就年齡因素對(duì)orexin覺(jué)醒機(jī)制的影響目前還沒(méi)有詳細(xì)報(bào)道。
　　本研究以老年大鼠吸入麻醉藥物異氟醚、七氟醚為麻醉模型，使用神經(jīng)行為學(xué)、腦電監(jiān)測(cè)方法觀察大鼠翻正反射時(shí)間，通過(guò)在麻醉過(guò)程中的典型腦電改變?cè)u(píng)估麻醉狀態(tài)。采取免疫熒光組化、RT-PCR、放射免疫法生物學(xué)技術(shù)，研究orexin-

5、A及受體(1,2)隨年齡分布不同對(duì)多年齡組大鼠覺(jué)醒時(shí)間的影響。探討年齡因素對(duì)orexin-A及受體在全麻覺(jué)醒機(jī)制中的相關(guān)問(wèn)題。結(jié)果如下
　　1、建立腦電監(jiān)測(cè)大鼠吸入麻醉行為學(xué)模型并分析腦電結(jié)果
　　通過(guò)分析腦電監(jiān)測(cè)結(jié)果我們觀察到大鼠在全麻過(guò)程中出現(xiàn)典型腦電循環(huán)，將腦電結(jié)果對(duì)比行為學(xué)觀察結(jié)果得出翻正發(fā)射消失、恢復(fù)時(shí)間于腦電誘導(dǎo)、覺(jué)醒時(shí)間一致。實(shí)驗(yàn)所使用的行為學(xué)全身麻醉觀測(cè)圓筒吸入麻醉藥物混合氣體濃度穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物腦電監(jiān)測(cè)模型

6、結(jié)果客觀，可以準(zhǔn)確的反應(yīng)吸入全身麻醉整體過(guò)程。對(duì)多年齡組大鼠腦電結(jié)果統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，腦電監(jiān)測(cè)可以準(zhǔn)確反應(yīng)麻醉深度，所有大鼠均出現(xiàn)麻醉腦電循環(huán)。
　　2、老齡大鼠麻醉行為學(xué)改變及腦電監(jiān)測(cè)覺(jué)醒階段的比較
　　老齡大鼠在使用異氟醚、七氟醚兩種經(jīng)典吸入麻醉藥物處理后，吸入麻醉藥物引起的麻醉誘導(dǎo)時(shí)間于青年組無(wú)差異，而覺(jué)醒時(shí)間較青年組顯著延長(zhǎng)。這種延遲可以通過(guò)典型行為學(xué)變化判斷，并且通過(guò)典型腦電圖改變證實(shí)。使用相同處理方式、處理環(huán)境、并使用腦

7、電監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)老年組大鼠從麻醉開(kāi)始向淺麻醉過(guò)渡直至深麻醉階段于青年組一致，整個(gè)誘導(dǎo)過(guò)程組間無(wú)差異。而老年大鼠從深麻醉階段向淺麻醉階段過(guò)渡直至覺(jué)醒雖麻醉深度一致，但老年組大鼠整個(gè)覺(jué)醒過(guò)程較青年組顯著延長(zhǎng)。
　　3、使用分子生物學(xué)監(jiān)測(cè)兩組大鼠的orexin及受體（1，2）表達(dá)
　　使用免疫熒光組化細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，發(fā)現(xiàn)老年組orexin陽(yáng)性神經(jīng)元較青年組增高，該結(jié)果通過(guò)較客觀的放射免疫法和RT-PCR證實(shí)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)orexin受體（1，