不同全麻藥對老年大鼠獲取空間學習記憶能力的影響及相關(guān)機制的研究.pdf

1、目的：本研究通過體外實驗觀察異氟醚、七氟醚和異丙酚對β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)的促寡聚化作用以及腦室注射Aβ1-40單體后麻醉對老年大鼠Morris水迷宮訓練成績、海馬內(nèi)信號傳導通路和tau蛋白過度磷酸化的影響，探討全麻藥對腦內(nèi)Aβ1-40的促寡聚化作用及其對學習記憶能力的影響。 方法：①體外實驗分為空白組(Aβ1-40單體)、I組(Aβ1-40單體+異氟醚)、S組(Aβ1-40單體+七氟醚)和P組(Aβ1-40單體+

2、異丙酚)，應用熒光分光光度計在30min、1d、2d、3d、4d、5d、6d和7d時檢測各組熒光強度，觀察1.3MAC異氟醚和七氟醚及3μg/ml異丙酚對0.2mg/mlAβ1-40單體的促寡聚化作用；應用透射電鏡觀察空白組在30min和7d以及其余三組在4d和7d時Aβ1-40的形態(tài)。②100只20月齡的雄性老年大鼠，隨機分為對照組(腦室注射NS)，Aβ1/Aβ2/Aβ3組(腦室注射Aβ1-40單體/可溶性Aβ1-40寡聚體/不溶性纖

3、維狀Aβ1-40)，I+NS/I+Aβ1組(腦室注射NS/Aβ1-40單體后吸入1.3MAC異氟醚)，S+NS/S+Aβ1組(腦室注射NS/Aβ1-40單體后吸入1.3MAC七氟醚)，P+NS/P+Aβ1組(腦室注射NS/Aβ1-40單體后腹腔注射100mg/kg異丙酚麻醉)。麻醉后2周進行Morris水迷宮訓練，測試各組老年大鼠獲取空間學習記憶的能力。行為學測試結(jié)束后立刻斷頭取海馬，采用western-blot生物學技術(shù)，檢測老年大鼠

4、海馬內(nèi)p-CaMKⅡ、p-CREB、p-JNK、p-p38和p-tau表達水平。 結(jié)果：①熒光分析顯示：I組在各時點的熒光強度均明顯增強(P＜0.05)；S組在3、4d以外各時點內(nèi)熒光強度顯著增強(P＜0.05)；P組僅在30min時熒光強度顯著高于空白組(P＜0.05)；②透射電鏡結(jié)果顯示：I組Aβ1-404d時可以見到比空白組7d更加密集的纖維狀聚集物，在7d時Aβ1-40聚集成團狀；S組4d時Aβ1-40無明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，

5、但7d時可以見到比空白組7d更加明顯的網(wǎng)狀聚集物；P組4d時Aβ1-40主要以無定形結(jié)構(gòu)存在，7d時僅僅有少量纖維狀聚集。③行為學測試結(jié)果表明：Aβ2組、Aβ3組、I+NS組和S+NS組老年大鼠記憶質(zhì)量下降(P＜0.05)；I+Aβ1組和S+Aβ1組老年大鼠空間記憶能力進一步下降(P＜0.05)；P+NS組與P+Aβ1組老年大鼠均表現(xiàn)出學習速度下降(P＜0.05)。④Westrn-blot生物學技術(shù)檢測結(jié)果顯示： Aβ2組、Aβ3組、I

6、+NS組、I+Aβ1組、S+NS組、S+Aβ1組和P+NS組海馬內(nèi)p-CaMKII和p-CREB含量均明顯降低(P＜0.05)，P+Aβ1組僅p-CaMKII含量降低(P＜0.05)；Aβ2組、Aβ3組、I+NS組、I+Aβ1組和S+Aβ1組p-JNK和p-p38含量均明顯升高(P＜0.05)，S+NS組僅p-p38含量顯著增加(P＜0.05)，P+NS組和P+Aβ1組二者含量均無顯著變化；Aβ2組、Aβ3組、I+Aβ1組和S+Aβ1組

7、p-tau為陽性，其余各組均為陰性。 結(jié)論：①異氟醚和七氟醚在體外均顯著促進Aβ1-40單體發(fā)生寡聚化，而異丙酚的作用不顯著；②異氟醚，七氟醚和異丙酚均可引起老年大鼠認知功能損害和海馬內(nèi)與LTP相關(guān)信號傳導系統(tǒng)的廣泛抑制，其中異氟醚的抑制作用最為嚴重；③可溶性Aβ1-40寡聚體也可抑制海馬信號傳導系統(tǒng)并導致海馬內(nèi)tau蛋白過度磷酸化；④異氟醚和七氟醚可能通過促進腦內(nèi)可溶性Aβ1-40單體發(fā)生寡聚化生成具有神經(jīng)毒性的寡聚物，對信號