脆性X綜合征致病基因FMR1突變?cè)谥袊?guó)正常女性人群中的攜帶率篩查研究.pdf

1、脆性X綜合征(Fragile X Syndrome, FXS, OMIM 300624)是最常見(jiàn)的遺傳性智力低下疾病之一。位于Xq27.3處的FMR1（fragile X mental retardation 1）基因5’端非編碼區(qū)(CGG)n重復(fù)序列的異常擴(kuò)增是該病的主要病因。正常人的(CGG)n通常在45以下；45-55為灰色區(qū)域；當(dāng)(CGG)n在55-200個(gè)之間（前突變），則可能導(dǎo)致孤獨(dú)癥、女性的卵巢早衰、男性的脆性X相關(guān)的震顫

2、/共濟(jì)失調(diào)等疾??；當(dāng)(CGG)n達(dá)到或超過(guò)200（全突變）時(shí)，則可引起脆性X綜合征的發(fā)生。
　　 FMR1基因異常擴(kuò)增的(CGG)n具有動(dòng)態(tài)突變的特點(diǎn)，在通過(guò)女性傳代的過(guò)程中，(CGG)n通常會(huì)進(jìn)一步擴(kuò)增，所以人群中脆性X綜合征患兒一般都是由其母親攜帶的前突變進(jìn)一步擴(kuò)增所致。因此，在育齡婦女中開(kāi)展脆性X綜合征攜帶者篩查，是預(yù)防脆性X綜合征發(fā)生的重要手段。
　　 目前一些西方發(fā)達(dá)國(guó)家開(kāi)展的以育齡女性FMR1突變篩查為主的F

3、XS人群干預(yù)項(xiàng)目取得了良好的衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)效益。然而針對(duì)我國(guó)女性人群FMR1基因突變攜帶率的研究還未見(jiàn)報(bào)道。且目前國(guó)內(nèi)分子診斷水平相對(duì)落后，技術(shù)的瓶頸嚴(yán)重制約了人群干預(yù)手段的評(píng)估和開(kāi)展。
　　 為了評(píng)價(jià)脆性X綜合征攜帶者篩查在中國(guó)的適用性，本研究的第一部分旨在建立一個(gè)快速、高效的FMR1基因(CGG)n重復(fù)序列異常擴(kuò)增檢測(cè)體系，為臨床診斷和大規(guī)模的人群篩查奠定基礎(chǔ)。我們通過(guò)優(yōu)化PCR條件，提高PCR的擴(kuò)增效率和分辨率，建立起了一套高

4、效、準(zhǔn)確的PCR檢測(cè)體系，同時(shí)結(jié)合 Southern印跡技術(shù)，實(shí)現(xiàn)適合臨床開(kāi)展的對(duì)FMR1基因突變的快速篩查。
　　 本研究的第二部分進(jìn)行中國(guó)正常女性人群的攜帶率篩查。我們使用本實(shí)驗(yàn)室建立的檢測(cè)平臺(tái)，對(duì)920名孕婦進(jìn)行了FMR1基因(CGG)n的檢測(cè)。在所有檢測(cè)樣本中，65％的樣本兩個(gè)等位FMR1基因的(CGG)n為雜合，其中29和30個(gè)拷貝數(shù)最常見(jiàn)。在整個(gè)檢測(cè)隊(duì)列中，我們發(fā)現(xiàn)了1例前突變樣本（CGG拷貝數(shù)為69），8例灰色區(qū)域