STAT3表達與鼻咽癌細胞凋亡的關(guān)系及機制研究.pdf

1、[目的] 研究STAT3及相關(guān)基因在鼻咽癌中的表達；研究STAT3信號通路阻滯劑AG490對鼻咽癌細胞增殖和凋亡的影響及其機制；探討EB病毒LMP1基因?qū)Ρ茄拾┘毎鲋车蛲龊蚐TAT3表達的影響。 [方法] 1.采用免疫組化SP法檢測45例鼻咽癌、27例鼻咽粘膜慢性炎組織中LMP1、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)和Survivin蛋白的表達。 2.體外培養(yǎng)人低分化鼻咽癌細胞系CNE2-Z、

2、人高分化鼻咽癌細胞系CNE1及轉(zhuǎn)染了EB病毒LMP1基因的CNE1細胞-CNE1-GL細胞，不同劑量的STAT3抑制劑AG490作用于鼻咽癌CNE2-Z細胞。通過繪制細胞生長曲線、平板克隆形成實驗、MTT法檢測細胞增殖；流式細胞術(shù)、Hoechst33342/PI雙熒光活染法檢測細胞凋亡；RT-PCR、Western blot、免疫細胞化學方法檢測 STAT3、Survivin和Mcl-1等基因的表達。 [結(jié)果] 1.免疫

3、組化結(jié)果顯示，鼻咽癌組織中LMP1、STAT3、p-STAT3和Survivin蛋白的陽性率均高于鼻咽粘膜慢性炎組織(P<0.01)。相關(guān)分析結(jié)果顯示，LMP1和p-STAT3、STAT3和Survivin、STAT3和p-STAT3表達之間呈正相關(guān)關(guān)系(γ值分別為0.302、0.318和0.328，P<0.05)。 2.與CNE1細胞相比，CNE1-GL細胞生長加快，克隆形成能力增強，STAT3活化程度增加，Survivin基

4、因表達上調(diào)，但細胞凋亡率及Mcl-1表達無明顯變化。 3.AG490可明顯抑制CNE2-Z細胞生長，使細胞克隆形成能力減弱，凋亡率增加，STAT3活化程度降低，Survivin、Mcl-1基因表達下調(diào)。 [結(jié)論] 1.鼻咽癌中存在STAT3蛋白高表達和持續(xù)激活，STAT3可能通過調(diào)節(jié)Survivin基因表達參與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展，LMP1基因可能參與STAT3的活化。 2.EB病毒LMP1基因?qū)肟墒笴NE