鼻咽癌細胞增殖凋亡與放射敏感性相關(guān)關(guān)系的研究.pdf

1、放射治療是目前臨床上治療腫瘤常用的治療手段,然而各種腫瘤甚至患有同一種腫瘤的不同病人其療效卻大有差異。影響放射治療效果的因素很多,其中腫瘤細胞內(nèi)在的放射敏感性是關(guān)鍵因素之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織的粗略估計,世界上80％左右的鼻咽癌發(fā)生在我國,廣東最為常見。放射治療是鼻咽癌的主要治療手段,但臨床上,病理分型和臨床分期相同、在進行同一劑量及方式治療時,患者卻有著不同的放射敏感性和放療效果,雖然其影響因素是多方面的,但腫瘤細胞的增殖活性和細胞凋亡無

2、疑是影響腫瘤細胞放射敏感性的重要因素。如能尋找到與鼻咽癌放射敏感性相關(guān)的細胞增殖凋亡的生物標志,則可在放療前預(yù)先測知其敏感性的高低,從而有針對性改進治療方案,提高各個病人的療效。本研究通過探討細胞增殖的生物標志PCNA、P53蛋白、DNA含量和MI以及細胞凋亡的生物標志SAI、Bcl-2和Bax蛋白與鼻咽癌放射敏感性的關(guān)系,期望找到預(yù)測鼻咽癌放射敏感性的生物學標志。
　　方法：
　　1.研究對象:選擇1997年5月-2001

3、年12月期間汕頭大學醫(yī)學院病理科收檢的51例放療前鼻咽癌組織標本。
　　2.組織學切片HE染色:作病理組織學診斷和MI計數(shù)。
　　3.免疫組織化學方法:EnVision法檢測51例放療前鼻咽癌組織中PCNA、P53、Bcl-2及Bax蛋白的表達。
　　4.TUNEL法:檢測放療前鼻咽癌組織中自發(fā)性細胞凋亡程度,以自發(fā)性凋亡指數(shù)(SAI)表示。
　　5.圖像分析法:檢測鼻咽癌DNA含量和細胞核的形態(tài)定量參數(shù)。

4、>　　5.圖像分析法:檢測鼻咽癌DNA含量和細胞核的形態(tài)定量參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.病理組織學診斷:按WHO(1991)標準分型,51例鼻咽癌中,角化型鱗狀細胞癌3例,分化型非角化性癌30例,未分化型癌18例。
　　2.細胞增殖指標檢測
　　(1)PCNA和P53蛋白表達:51例鼻咽癌組織中PCNA和P53蛋白表達陽性者分別有50例(98.0%)和46例(90.2%),高表達者分別有16例(31.4%)和22

5、例(43.1%);鼻咽癌組織中PCNA表達與P53蛋白表達呈顯著相關(guān)關(guān)系(P<0.01);PCNA和P53蛋白表達在角化型鱗狀細胞癌、分化型非角化性癌和未分化型癌組織類型之間均無顯著性差異;PCNA和P53蛋白表達在T分期之間、N分期之間及Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期之間均無顯著性差異;PCNA和P53蛋白的陽性表達水平越高,則鼻咽癌對放射治療越敏感,放療后鼻咽局部癌腫完全消退率越高(P<0.05);PCNA和P53蛋白同時高表達者比單一指標高表達

6、者,其放射敏感性更高(P<0.05)。用卡方分析法和Kaplan-Meier法作3年生存率的比較均未顯示PCNA和P53蛋白的高表達與低表達之間有顯著性差異。
　　(2)DNA含量和細胞核形態(tài)參數(shù)檢測:51鼻咽癌中,完全消退組36例DI為2.16±0.40,殘留組15例DI為1.70±0.20,兩組有高度顯著性差異(P<0.01)。完全消退組DNA異倍體細胞所占百分率比殘留組高(P<0.01)。鼻咽癌完全消退組細胞核形態(tài)參數(shù)中面積

7、、周長及直徑高于殘留組,有顯著性差異(P<0.05)。
　　(3)MI計數(shù):51鼻咽癌中,完全消退組36例MI為3.11±2.05,殘留組15例MI為1.95±1.23,兩組有顯著性差異(P<0.05)。
　　(4)細胞增殖指標之間的相關(guān)性分析:在PCNA、P53、DI和MI4指標中,除P53與DI和MI無明顯相關(guān)性外,其他指標之間均存在明顯的相關(guān)性。
　　3.細胞凋亡指標檢測
　　(1)自發(fā)性凋亡指數(shù)(SAI)

8、:51鼻咽癌中,完全消退組36例SAI平均為37.17±36.19,殘留組15例SAI平均為16.84±22.35,兩組有顯著性差異(P<0.05)。
　　(2)Bcl-2和Bax蛋白表達:51例鼻咽癌組織中Bcl-2和Bax蛋白表達陽性者均為47例(92.2%);Bcl-2蛋白高表達者26例(51.0%),Bax蛋白高表達者25例(49.0%);鼻咽癌組織中Bcl-2和Bax蛋白的表達強度呈顯著相關(guān)關(guān)系(P<0.05);Bcl-

9、2和Bax蛋白表達在角化型鱗狀細胞癌,分化型非角化性癌和未分化型癌組織類型之間均無顯著性差異;Bcl-2和Bax蛋白表達在T分期之間、N分期之間及Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期之間均無顯著性差異;鼻咽癌組織SAI與Bcl-2和Bax蛋白自身表達無明顯相關(guān)性,但與Bcl-2/Bax比率呈負相關(guān);Bcl-2蛋白的表達與鼻咽癌放射敏感性呈負相關(guān)(P<0.05),而Bax蛋白的表達與鼻咽癌放射敏感性無關(guān)(P>0.05); Bcl-2/Bax的比率與鼻咽癌放射

10、敏感性呈負相關(guān)(P<0.05)。用卡方分析法和Kaplan-Meier法作3年生存率的比較均未顯示Bcl-2和Bax蛋白的高表達與低表達之間有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.細胞增殖的生物學標志PCNA、P53蛋白、DNA含量、MI和癌細胞核形態(tài)定量指標是反映鼻咽癌放射敏感性和預(yù)測鼻咽癌近期療效的重要指標。
　　2.PCNA和P53蛋白對鼻咽癌放射敏感性有協(xié)同作用,雙指標的綜合評價比單一增殖指標更有意義。