鼻咽癌細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因表達(dá)與放射敏感性的關(guān)系研究.pdf

1、目的：探討鼻咽癌細(xì)胞自發(fā)性凋亡及輻射誘發(fā)的細(xì)胞凋亡對(duì)放射敏感性的預(yù)測(cè)作用，進(jìn)一步闡明凋亡及放射敏感性存在差異的分子學(xué)基礎(chǔ)。
　　方法:
　?。?）克隆形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定CNE-1、CNE-2不同劑量照射后的存活分?jǐn)?shù)，單擊多靶模型和線性二次函數(shù)模型擬合輻射劑量存活曲線并求出放射生物學(xué)參數(shù)。
　　（2）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CNE-1、CNE-2自然生長(zhǎng)天數(shù)（2，4，6，8 d）下細(xì)胞凋亡情況，RT-PCR、Westernblot方法檢

2、測(cè)CNE-1、CNE-2自然狀態(tài)下凋亡相關(guān)基因Bax、Bak、Bad、Bid、Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平。
　　（3）流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR方法檢測(cè)不同劑量X線（2，4，6，8 Gy）照射后CNE-1、CNE-2凋亡率及凋亡相關(guān)基因Bax、Bak、Bad、Bid、Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w的轉(zhuǎn)錄水平。
　　結(jié)果:
　　（1）CNE-1在各個(gè)劑量點(diǎn)的存活分?jǐn)?shù)均比CNE-2高，函數(shù)模

3、型相關(guān)參數(shù)顯示：N CNE-1>N CNE-2，D0 CNE-1>D0 CNE-2，Dq CNE-1>Dq CNE-2，α CNE-1<α CNE-2，βCNE-1>βCNE-2，α/β CNE-1<α/β CNE-2，SF2 CNE-1>SF2 CNE-2。
　　（2）相同培養(yǎng)天數(shù)及相同劑量點(diǎn) CNE-2早期凋亡率及晚期凋亡率明顯高于 CNE-1(均P<0.05)；
　?。?）自然狀態(tài)下CNE-2中抑凋亡基因Bcl-2、B

4、cl-xl、Bcl-w及促凋亡基因Bax、Bad、Bid、Bak轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平均明顯高于 CNE-1（均 P<0.05）。
　?。?） CNE-1照射后出現(xiàn)Bax表達(dá)上調(diào)，與輻射劑量呈正相關(guān)；Bcl-xl表達(dá)下調(diào)，與輻射劑量無(wú)明顯相關(guān)性；Bcl-2表達(dá)上調(diào)，在4Gy時(shí)到達(dá)峰值后開始下降。CNE-2照射后出現(xiàn) Bax、Bak表達(dá)上調(diào)，Bcl-w表達(dá)下調(diào)，與輻射劑量分別呈正、負(fù)相關(guān)性；Bcl-xl表達(dá)下調(diào)，與輻射劑量無(wú)明顯相關(guān)性。