2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、骨橋蛋白(osteopontin,OPN),是一種在多種組織和細(xì)胞廣泛表達(dá)的磷酸化糖蛋白。OPN具有多種生物學(xué)功能,特別是OPN與自身免疫,腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。
　　 目的:制備人骨橋蛋白(osteopontin,OPN)特異性單克隆抗體(mAb),并鑒定其生物學(xué)功能.
　　 方法:利用RT-PCR技術(shù)克隆人骨橋蛋白(hOPN)基因.構(gòu)建OPN原核表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化BL21菌株,IPTG誘導(dǎo)表達(dá)rhOPN.利用純化

2、的rhOPN蛋白為免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞NS1融合,通過(guò)有限稀釋法進(jìn)行克隆和間接ELISA篩選,獲得抗人OPN蛋白mAb雜交瘤細(xì)胞株,以ELISA、Western blot對(duì)抗體特異性進(jìn)行鑒定.通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)對(duì)單克隆抗體識(shí)別抗原位點(diǎn)進(jìn)行分析.通過(guò)細(xì)胞侵襲試驗(yàn)檢測(cè)抗人OPN單克隆抗體的功能.
　　 結(jié)果:獲得2株抗人OPN單克隆抗體,分別命名為8F1和2B5,亞型測(cè)定皆為IgG1,且這2株抗體皆

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