抗肌肉特異性激酶單克隆抗體對(duì)大鼠重癥肌無(wú)力的誘導(dǎo).pdf

1、目的：通過(guò)建立 Lewis大鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力(myasthenia gravis，MG)模型(experimental autoimmune MG，EAMG)，以此研究肌肉特異性激酶（muscle-specific kinase，MuSK）抗體(muscle-specific kinase antibody，MuSKAb)和MG發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。
　　方法：選取10只雌性Lewis大鼠，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。采用被動(dòng)免

2、疫的方法，將MuSK單克隆抗體通過(guò)腹腔注射的方式給予實(shí)驗(yàn)組大鼠，對(duì)照組大鼠采用同樣的方法給藥，每2小時(shí)觀察1次大鼠的飲食飲水情況以及有無(wú)臨床癥狀出現(xiàn)，并隨時(shí)記錄大鼠的體重變化。給藥96小時(shí)后，迅速處死兩組大鼠，并取下大鼠的肋間肌、腓腸肌和脛前肌，與-80℃冰箱中保存。之后對(duì)于取下的肌肉組織進(jìn)行免疫熒光實(shí)驗(yàn)，用以觀察抗MuSK單克隆抗體和MuSK蛋白結(jié)合情況和C3補(bǔ)體激活情況。同時(shí)做透射電鏡實(shí)驗(yàn)，用以觀察神經(jīng)肌肉接頭處（NMJ）的形態(tài)學(xué)變

3、化。
　　結(jié)果：在給藥96小時(shí)后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，未出現(xiàn)抓握和嘶叫無(wú)力的明顯臨床癥狀。經(jīng)過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組肋間肌、腓腸肌和脛前肌的細(xì)胞膜表面出現(xiàn)明顯的黃綠色熒光和紅色熒光物質(zhì)，黃綠色熒光說(shuō)明MuSK單克隆抗體和跨膜蛋白MuSK發(fā)生特異性結(jié)合，紅色熒光說(shuō)明C3補(bǔ)體抗體和C3發(fā)生特異性結(jié)合。而對(duì)照組無(wú)熒光出現(xiàn)。透射電鏡觀察顯示實(shí)驗(yàn)組大鼠運(yùn)動(dòng)終板突觸后區(qū)域簡(jiǎn)單化，突觸后膜皺褶退化，分級(jí)減少并短縮，突觸間隙略增寬。而實(shí)驗(yàn)組無(wú)明