情緒應(yīng)激對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血清及斑塊炎癥標(biāo)志物的影響.pdf

1、背景和目的：急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)是以不穩(wěn)定型心絞痛、急性心肌梗死或心臟性猝死為臨床表現(xiàn)的急性缺血綜合征?，F(xiàn)已證明，斑塊破裂、血小板聚集及血栓形成是急性冠脈綜合征的主要發(fā)病機(jī)制，炎癥在斑塊破裂的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。血清中與炎癥有關(guān)的生物標(biāo)志物白介素-6(interleukin-6，IL-6)、細(xì)胞間黏附分-1(Intracellar adhersion molecule-1，ICAM-1

2、)、C反應(yīng)蛋白((C-reactive protein,CRP)等升高與冠脈斑塊不穩(wěn)定密切相關(guān)，已成為心血管不良事件發(fā)生的預(yù)測(cè)指標(biāo)。 冠心病的基本病因?yàn)閯?dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)。有研究者報(bào)道大約40﹪的動(dòng)脈粥樣硬化與心理應(yīng)激密切相關(guān)。應(yīng)激尤其是心理應(yīng)激，不僅可以通過(guò)生活習(xí)慣或長(zhǎng)期作用慢性地促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化，而且還可以直接誘發(fā)心絞痛、心肌梗死的急性發(fā)作，使心肌梗死的預(yù)后惡化。Gidron等認(rèn)為社會(huì)心理因

3、素如抑郁、敵意、焦慮等心理應(yīng)激可通過(guò)促使炎性細(xì)胞釋放白介素1、6(interleukin-1，6；IL-1，6)，腫瘤壞死因子-a(tumornecrosis factor-alpha，TNF-α)和化學(xué)趨化因子(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1；interleukin-8,IL-8)誘導(dǎo)白細(xì)胞趨附與內(nèi)皮細(xì)胞，激活斑塊內(nèi)的單核細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)，導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)；炎性細(xì)胞因子和白細(xì)胞堆積，破壞血

4、管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，誘導(dǎo)血管痙攣；凝血纖溶改變和炎癥因子導(dǎo)致的促凝因子增加、抗凝因子(蛋白C)下降，導(dǎo)致血栓形成等機(jī)制導(dǎo)致ACS。研究發(fā)現(xiàn)心理應(yīng)激可引起急性炎癥反應(yīng)，使CRP、IL-6、ICAM-1等濃度增高，后者參與動(dòng)脈粥樣硬化的細(xì)胞浸潤(rùn)過(guò)程，促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成，對(duì)冠心病的發(fā)病具有重要作用。然而心理應(yīng)激對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的直接影響尚不清楚，能否用炎癥因子水平反映應(yīng)激者的應(yīng)激程度預(yù)測(cè)其冠脈事件的風(fēng)險(xiǎn)亦不清楚。因此，闡明該問(wèn)題對(duì)冠

5、心病的預(yù)防及治療具有重要意義。 本課題研究旨在在動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型基礎(chǔ)上:(1) 評(píng)價(jià)慢性空瓶情緒應(yīng)激(情緒應(yīng)激，一種心理應(yīng)激方式)對(duì)斑塊內(nèi)炎癥指標(biāo)ICAM-1的直接影響，探討情緒應(yīng)激在ACS發(fā)病中的地位、機(jī)制。(2) 評(píng)價(jià)血液IL-6，CRP，sICAM-1與斑塊內(nèi)炎癥指標(biāo)ICAM-1的相關(guān)性，探討利用血液炎癥指標(biāo)反映斑塊內(nèi)炎癥活動(dòng)的可靠性。(3) 分析不同應(yīng)激狀態(tài)下炎癥指標(biāo)表達(dá)水平是否不同，推測(cè)其臨床應(yīng)用價(jià)值。 材

6、料與方法：健康純利Sprague-Dawley大鼠50只，體重180～220g，按體重隨機(jī)分為正常組(n=6)和動(dòng)脈粥樣硬化組(n=44)，正常組給以普通飲食+一次性生理鹽水腹腔注射；動(dòng)脈粥樣硬化組給以高脂飲食+一次性大劑量維生素D<,3>腹腔注射，喂養(yǎng)8周。將建立動(dòng)脈粥樣硬化模型的44只動(dòng)物按體重隨機(jī)分為3組：無(wú)應(yīng)激組(n=10)，生理應(yīng)激組(n=12)，情緒應(yīng)激組(n=12)。按邵楓等的方法制作情緒應(yīng)激模型。于第10周末次應(yīng)激后1小

7、時(shí)采集血標(biāo)本，采用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)和酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測(cè)定血清IL-6、sICAM-1、CRP濃度。處死動(dòng)物，取出心臟和主動(dòng)脈，行病理學(xué)檢查和免疫組化檢查主動(dòng)脈內(nèi)ICAM-1表達(dá)情況。 結(jié)果：(1) 動(dòng)脈粥樣硬化模型建立的確認(rèn)。AS建立的標(biāo)準(zhǔn)為HE染色示主動(dòng)脈血管內(nèi)皮連續(xù)性中斷，管壁局部向管腔突出形成斑塊；內(nèi)膜下鈣

8、化；中膜平滑肌增生、排列紊亂、彈力纖維斷裂、鈣化；外膜變薄。冠狀動(dòng)脈平滑肌增生，鈣化。動(dòng)脈粥樣硬化組有18只動(dòng)物符合上述標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)符合標(biāo)準(zhǔn)者進(jìn)行了下一步研究。對(duì)照組血管各層結(jié)構(gòu)基本正常。 (2) 主動(dòng)脈：ICAM-1表達(dá)在動(dòng)脈粥樣硬化各組切片明顯高于對(duì)照組(均P<0.01)。情緒應(yīng)激組顯著高于無(wú)應(yīng)激組、生理應(yīng)激組(2.18±0.17 vs1.58±0.22，1.22±0.15，均P<0.001)；生理應(yīng)激組顯著高于無(wú)應(yīng)激組(1.5

9、8±0.22 vs 1.22±0.15，P=0.001)。 (3) 情緒應(yīng)激組大鼠血清IL-6(51.80±4.60 pg/ml vs 27.60±4.19pg/ml，8.01±1.39 pg/ml，7.83±1.37 pg/ml)、slCAM-1(1.24±0.25 vs 0.85±0.09，0.62±0.17，0.57±0.11)、CRP(1.00±0.37 vs 0.90±0.29，1.01±0.22，0.71±0.13)

10、濃度較其他各組明顯升高(均P<0.05)；血清sICAM-1、IL-6、CRP水平與主動(dòng)脈：ICAM-1表達(dá)之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.75，r=0.87，P<0.01；r=0.59，P=0.01)。 結(jié)論：1.動(dòng)物試驗(yàn)顯示，情緒應(yīng)激可使動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)炎癥因子ICAM-1表達(dá)升高，同時(shí)，血液IL-6、CRP、sICAM-1水平升高，提示情緒應(yīng)激通過(guò)炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊由穩(wěn)定性向不穩(wěn)定性轉(zhuǎn)變中發(fā)揮重要作用。 2.