

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、隨著新型超聲造影劑(UCA)的不斷出現(xiàn)和超聲造影新技術(shù)的飛速發(fā)展,明顯提高了超聲診斷心、肝、腎、腦等實(shí)質(zhì)性器官病變的敏感性和特異性,但大多數(shù)超聲造影劑無定向選擇性(即無靶向性),因此很難對(duì)疾病進(jìn)行特異性的定性及定位診斷。本研究首先制備出用于實(shí)驗(yàn)的表面活性劑超聲造影劑(SPMB),并初步觀察其理化性質(zhì),急性動(dòng)物毒性和顯像效果,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步將其制備成對(duì)激活的中性粒細(xì)胞(PMN)具有靶向性的超聲造影劑,觀察其對(duì)腎臟和心肌缺血再灌注損傷的顯
2、像效果并分析與髓過氧化物酶(MPO)的相關(guān)性,并且在體外細(xì)胞水平分析其靶向性作用的可能機(jī)制。 表面活性劑超聲造影劑的制備、安全性及顯像效果的實(shí)驗(yàn)研究 (一)表面活性劑超聲造影劑的制備及其急性毒性動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 以司盤60(Span60)和吐溫80(Tween80)為原材料,經(jīng)高溫加熱熔融,冷卻變性后,最后在聲振同時(shí)緩慢充入八氟丙烷(C3F8)氣體,制備成SPMB微泡,激光粒度散射儀測(cè)量微泡的粒徑分布,血球計(jì)數(shù)儀計(jì)算微泡
3、的濃度,光鏡下觀察微泡的形態(tài),并觀察隨時(shí)間的延長(zhǎng)微泡粒徑、濃度及形態(tài)的變化。以62只清潔級(jí)小白鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,按Bliss法分析SPMB的LD50值。并觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大體解剖改變和鏡下組織學(xué)改變。結(jié)果:光鏡下可見制備成功的SPMB呈圓球型,中空狀,散在分布,大小均勻一致,測(cè)得平均粒徑為2.56±1.20μm,濃度為(7.2±O.8)×109/mL。隨時(shí)間延長(zhǎng)SPMB的粒徑逐漸增大,濃度逐漸降低,形態(tài)未見明顯改變。急性毒性實(shí)驗(yàn)測(cè)得LD50值
4、為4.Ol(3.67-4.58)mL/kg。大體標(biāo)本可見,心臟充血嚴(yán)重,肺臟膨脹,表面有出血點(diǎn),肝臟、腎臟未見明顯改變。組織學(xué)觀察可見,心肌血管擴(kuò)張充血,間質(zhì)內(nèi)有少許紅細(xì)胞,心肌部分橫紋肌斷裂;肺泡壁間毛細(xì)血管內(nèi)見大量紅細(xì)胞,部分肺泡有破壞;肝結(jié)構(gòu)基本正常;腎小球、腎小管基本正常。結(jié)論:聲振法可成功制備SPMB,該造影劑的穩(wěn)定性較好,毒性較弱,可以滿足實(shí)驗(yàn)使用。 (二)表面活性劑超聲造影劑對(duì)犬正常心肌的顯像效果 用上述實(shí)
5、驗(yàn)中制備的SPMB對(duì)七只開胸犬的正常心肌進(jìn)行顯像觀察,將造影劑稀釋10、20、30倍,分別對(duì)心肌進(jìn)行顯像,觀察其不同的顯像效果并對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果:造影劑的劑量在稀釋10倍至30倍之間時(shí),均是在觸發(fā)間歇為l:8個(gè)心動(dòng)周期時(shí)心肌顯像效果最佳,此時(shí)造影劑在心肌組織內(nèi)達(dá)到飽和狀態(tài)。隨著稀釋倍數(shù)的增加,心肌顯像的視覺效果越弱,后方的聲影也越弱,前壁、后壁心肌和心腔內(nèi)回聲強(qiáng)度也明顯降低,三組之間相互比較,差異有非常顯著性意義(P<0.0
6、1),只有側(cè)壁心肌沒有明顯改變(P>O.05)。當(dāng)造影劑稀釋20倍時(shí),心肌顯像視覺效果較明顯,后方聲影不是很強(qiáng)烈,前壁、后壁心肌和心腔內(nèi)回聲強(qiáng)度沒有明顯減低。結(jié)論:SPMB成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)正常心肌組織的顯像,本研究還發(fā)現(xiàn)其稀釋20倍時(shí)的濃度對(duì)心肌組織顯像的效果較理想,最利于觀察心肌血流灌注情況。 二、靶向超聲造影劑評(píng)價(jià)組織缺血再灌注損傷及作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究 (一)靶向超聲造影劑評(píng)價(jià)兔腎臟缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究 將S
7、PMB表面結(jié)合上磷脂酰絲氨酸(PS),制備成對(duì)激活的中性粒細(xì)胞(PMN)具有靶向性的造影劑(SPMB-PS),流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)PS位于微泡的表面,比較SPMB-PS與SPMB的形態(tài)及大小。12只新西蘭大白兔,隨機(jī)分為2組,靶向組(SPMB-PS)和非靶向組(SPMB),在腎臟缺血一再灌注(I-R)損傷模型建立前后進(jìn)行顯像,然后擬合出造影顯像的時(shí)間-強(qiáng)度曲線(TIC)。另取6只新西蘭大白兔建立腎臟I-R損傷模型,用SPMB-PS對(duì)
8、I-R腎臟進(jìn)行顯像15min后,立即取組織塊進(jìn)行髓過氧化物酶(MP0)活性測(cè)定并進(jìn)行免疫組織化學(xué)分析。最后分析I-R腎臟造影后15min的回聲強(qiáng)度與MPO的關(guān)系。結(jié)果:SPMB-PS與SPMB的形態(tài)及大小基本一致。FCM檢測(cè)發(fā)現(xiàn),SPMB-PS被AnnexinV-FITC標(biāo)記后,熒光曲線明顯右移,證明了PS結(jié)合在SPMB的表面。從腎臟造影顯像的TIC曲線可見,SPMB-PS與SPMB對(duì)正常腎臟顯像時(shí),其達(dá)峰時(shí)間和排空時(shí)間基本一致,造影后
9、15min基本排空。對(duì)I-R腎臟顯像時(shí),其達(dá)峰時(shí)間一致,但SPMB-PS的排空時(shí)間與SPMB比較明顯延遲。SPMB-PS與SPMB對(duì)正常腎臟造影后15min的回聲強(qiáng)度無差異(P>O.05),而對(duì)I-R腎臟造影后15min的回聲強(qiáng)度的差異有非常顯著性意義(P 10、SPMB-PS在對(duì)I-R。腎臟顯像時(shí)出現(xiàn)延遲排空現(xiàn)象,對(duì)激活的PMN具有靶向性,可以無創(chuàng)評(píng)價(jià)腎臟I-R損傷的嚴(yán)重程度。 (二)靶向超聲造影劑評(píng)價(jià)犬心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究 用SPMB-PS對(duì)9只犬心肌缺血再灌注(I-R)模型,采用延遲顯像的方式進(jìn)行實(shí)時(shí)心臟超聲造影(MCE)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,在正常心肌和I-R心肌處取組織塊立即進(jìn)行髓過氧化物酶(MPO)活性測(cè)定。分析I-R心肌部位回聲強(qiáng)度與MP0的相關(guān)性及其標(biāo)化后二者的相 11、關(guān)性。結(jié)果:實(shí)時(shí)MCE顯像發(fā)現(xiàn)I-R心肌部位的造影劑回聲較正常部位的回聲明顯增強(qiáng)。定量分析也表明I-R損傷心肌聲像圖的回聲強(qiáng)度(22.56±4.62GS)明顯增高,與正常心肌(16.57±3.82GS)和缺血心肌(5.00±2.58GS)比較,差異均有顯著性意義(P 12、-R部位,這對(duì)于無創(chuàng)評(píng)價(jià)心肌I-R損傷的嚴(yán)重程度有很大的臨床價(jià)值。 (三)靶向超聲造影劑的作用機(jī)制研究 取2×107個(gè)AnnexinV-FITC標(biāo)記的SPMB-PS與2×106個(gè)白細(xì)胞混合,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測(cè)定白細(xì)胞中的中性粒細(xì)胞(PMN)激活前后與SPMB-PS的結(jié)合情況,以及在補(bǔ)體和β2整合素中的Mac-1缺乏時(shí)激活的PMN與SPMB-PS的結(jié)合情況。結(jié)果:未激活的PMN與SPMB-PS的結(jié)合率為(5.27±O.
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 雙靶向脂質(zhì)超聲微泡造影劑評(píng)價(jià)缺血再灌注心肌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- ARFI無創(chuàng)性評(píng)價(jià)肝臟缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 超聲造影對(duì)腎缺血再灌注損傷后血流灌注的評(píng)價(jià).pdf
- 超聲聯(lián)合微泡造影劑輻照對(duì)大鼠肝缺血再灌注早期保護(hù)作用的研究.pdf
- 靶向超聲造影劑和普通超聲造影劑對(duì)卵巢癌新生血管的評(píng)價(jià).pdf
- 新型超聲造影劑對(duì)腎組織血流灌注的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- P-選擇素靶向微泡造影劑評(píng)價(jià)小鼠下肢缺血-再灌注損傷及實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物血栓模型的制備.pdf
- P-選擇素靶向超聲分子成像評(píng)價(jià)心肌缺血再灌注損傷.pdf
- 超聲輻射力結(jié)合靶向超聲微泡評(píng)價(jià)小鼠腎缺血再灌注損傷的研究.pdf
- 脊髓缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 缺血再灌注損傷
- 微血管損傷的靶向超聲造影劑制備及其黏附效能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 靶向納米脂質(zhì)超聲造影劑評(píng)價(jià)肝臟儲(chǔ)備功能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 超聲造影監(jiān)測(cè)兔腎缺血再灌注損傷及其與腎組織ICAM-1表達(dá)關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 靶向微泡評(píng)價(jià)兔睪丸缺血-再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 基于靶向造影劑的超聲成像方法研究.pdf
- 攜帶抗P-選擇素單抗靶向微泡行對(duì)比超聲評(píng)價(jià)腎缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 超聲造影劑介導(dǎo)靶向基因治療大鼠肝癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 常溫脊髓缺血再灌注損傷監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 靶向脂質(zhì)納泡在肝臟缺血再灌注損傷中的分子顯像實(shí)驗(yàn)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論