乳腺干細(xì)胞介導(dǎo)環(huán)境雌激素雙酚A(BPA)的窗口敏感性研究.pdf

1、作為一個(gè)潛在的乳腺致癌物，雙酚A(BPA)普遍存在于環(huán)境中和人體內(nèi)。越來(lái)越多的證據(jù)表明BPA暴露可能跟人類疾病，例如乳腺癌的發(fā)生，存在某種聯(lián)系。先前以嚙齒類和非人類的靈長(zhǎng)類動(dòng)物的研究證據(jù)表明，低劑量BPA暴露能夠改變?nèi)橄俚恼０l(fā)展，如導(dǎo)致上皮細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生癌前和癌病變，這些變化在成年的乳腺中會(huì)進(jìn)一步顯現(xiàn)出來(lái)。這些異常變化的具體機(jī)制和本質(zhì)仍然是未知的，需要進(jìn)一步的研究。最新的研究發(fā)現(xiàn)乳腺干細(xì)胞對(duì)乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展十分敏感。
　　

2、目的：
　　本課題用新證據(jù)討論雙酚A誘導(dǎo)乳腺腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性的最敏感窗口和致瘤性轉(zhuǎn)化過(guò)程BPA最可能作用和誘發(fā)癌前變化的靶細(xì)胞。
　　方法：
　　年齡2.5月的FVB GFP小鼠從看到陰道栓的第九天用滲透泵連續(xù)暴露BPA28天，BPA溶解于50％的二甲基亞砜中，劑量分別為0，25，250 ng/kg/day。母鼠懷孕21天產(chǎn)下小鼠后，控制鼠崽個(gè)數(shù)在8-10個(gè)。21天后，小鼠分籠，將每個(gè)處理組得到的小鼠隨機(jī)分別各自分成三組

3、（對(duì)照組，0BPA組，250BPA組）。用于青春期研究的小鼠全部來(lái)自于對(duì)照組，3周齡小鼠分籠后開(kāi)始灌胃暴露BPA，連續(xù)28天，BPA溶解于芝麻油中，劑量分別是0，25，250μg/kg/day。用于圍產(chǎn)期和終生期的三個(gè)處理組的小鼠各自分別來(lái)自于對(duì)照組，25BPA組和250BPA組。終生期小鼠結(jié)束灌胃后，通過(guò)飲水連續(xù)暴露BPA，BPA溶解于50％的二甲基亞砜加到小鼠飲用水中，三組小鼠的BPA暴露的最終劑量0，25，250μg/kg/day

4、，與母鼠0，25，250ng/kg/day劑量相對(duì)應(yīng)。原生乳腺收集時(shí)間，懷孕期在鼠崽分籠后一個(gè)月，剩余時(shí)期在小鼠年齡七個(gè)月。組織收集后進(jìn)行乳腺干細(xì)胞的定性和定量分析，乳腺的形態(tài)分析，病理學(xué)特征分析。體外培養(yǎng)得到的實(shí)體3D結(jié)構(gòu)和空心3D結(jié)構(gòu)進(jìn)一步做小鼠體內(nèi)移植再生分析。
　　結(jié)果：
　　本研究結(jié)果顯示經(jīng)熒光激活細(xì)胞分選出的四個(gè)細(xì)胞群對(duì)BPA的暴露易感性存在不同，高劑量BPA似乎引起異常變化，如3D結(jié)構(gòu)直徑增加，再生乳腺出現(xiàn)淋巴

5、瘤和惡性癌前病變。此外，我們的結(jié)果顯示實(shí)體3D熒光高表達(dá)細(xì)胞群可能作為癌前起始源細(xì)胞群進(jìn)而反應(yīng)在其在干細(xì)胞等級(jí)的起源中。最后，青春期是唯一可以導(dǎo)致乳腺干細(xì)胞基底細(xì)胞群、管腔細(xì)胞群和間質(zhì)細(xì)胞群之間穩(wěn)態(tài)失衡的最敏感窗口。
　　結(jié)論：
　　使用體外干細(xì)胞定性和定量分析，我們發(fā)現(xiàn)乳腺干細(xì)胞(MaSCs)是研究雙酚A誘發(fā)乳腺早期腫瘤轉(zhuǎn)化的目標(biāo)易感靶點(diǎn)。我們的研究首次為敏感窗口雙酚A導(dǎo)致乳腺腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性提供一個(gè)新的視野。這些問(wèn)題的闡