利用重組DNA技術(shù)檢測MJD1基因CAG三核苷酸重復及SCA3-MJD產(chǎn)前診斷研究.pdf

1、背景: 遺傳性脊髓小腦性共濟失調(diào)(spinocerebellar ataxias，SCAs)是一組具有高度臨床和遺傳異質(zhì)性的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。患者多于中青年發(fā)病，臨床上以小腦性共濟失調(diào)為主要特征，還可伴有眼球運動障礙、視神經(jīng)萎縮、視網(wǎng)膜色素變性、錐體束征、錐體外系表現(xiàn)、肌萎縮等表現(xiàn)，多呈常染色體顯性遺傳(autosomal dominant，AD)。目前常染色體顯性SCA至少有28種基因型，其中18種亞型的致病基因已被克隆，包括SCA

2、1，SCA2，MJD1，PLEKHG4、SPTBN2、CACNA1A，SCA7，ATXN80S、ATXN10，TTBK2、PPP2R2B、KCNC3，PRKCG、ITPR1，CNTN4，TBP，F(xiàn)GF14及DRPLA。在己克隆的基因中，MAD1基因是SCA3/MJD的致病基因，其4號外顯子區(qū)存在一段CAG重復序列，正常人重復12-40次，患者常見的異常重復為51.86次。因此準確、直觀確定其CAG三核苷酸重復次數(shù)是從分子遺傳學方面確診S

3、CA3/MJD的關(guān)鍵。 目的: 運用重組DNA技術(shù)建立準確、直觀檢測MJD1基因CAG三核苷酸重復的技術(shù)平臺；運用該技術(shù)進行35例SCA3/MJD患者的基因診斷和中國大陸地區(qū)首例SCA3/MJD產(chǎn)前診斷。 方法：運用重組DNA技術(shù)完成中國大陸地區(qū)35例SCA3/MJD患者和10例正常人的MJD1基因CAG三核苷酸重復進行檢測及中國大陸地區(qū)首例SCA3/MJD產(chǎn)前診斷。 結(jié)果: 運用重組DNA技術(shù)對35例SCA3/

4、MJD患者和10例正常人的MJD1基因CAG三核苷酸重復進行檢測，準確直觀的檢測出患者MgD1基因CAG三核苷酸重復，重復范圍為65-81次，平均重復次數(shù)為73次。在SCA3/MJD患者MJD1基因CAG三核苷酸重復序列中發(fā)現(xiàn)CAG/CAA及CAG/TAG的多態(tài)變化。在產(chǎn)前診斷研究中，成功檢測出該SCA家系先證者、先證者父親及先證者所孕之胎兒的MJD1基因CAG三核苷酸重復次數(shù)分別為81次、74次、79次，完成產(chǎn)前診斷并證明MJDl基因