電針“神庭”、“百會”對腦缺血再灌注損傷大鼠認(rèn)知功能的影響及機(jī)制研究.pdf

1、　　目的
　　本研究擬通過建立局灶性腦缺血再灌注大鼠模型,電針“神庭”、“百會” 進(jìn)行干預(yù)處理,動物認(rèn)知行為學(xué)的評估及組織病理染色和分子生物學(xué)技術(shù),探討電針對局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠認(rèn)知障礙的治療作用,并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法
　　將60只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和電針組,每組各20只。通過大腦中動脈線栓法(MCAO)建立局灶性腦缺血再灌注認(rèn)知障礙動物模型,電針神庭和百會進(jìn)行干預(yù),

2、每天一次,共10天,每天電針結(jié)束后采用longe法進(jìn)行動物神經(jīng)功能學(xué)評分, Morris水迷宮評估模型大鼠空間學(xué)習(xí)、記憶能力；TTC染色觀察電針對模型大鼠腦梗塞體積的影響；Tunel 法檢測模型大鼠腦組織細(xì)胞凋亡的變化；Western Blot 及 RT-PCR 技術(shù)檢測腦缺血再灌注大鼠額葉皮質(zhì)組織 NF-кB-p65 蛋白及其下游Bax、Fas基因及蛋白水平。
　　結(jié)果
　　1 大鼠行為學(xué)評分
　　從造模

3、后第3天開始電針組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分開始下降,電針組與模型組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；電針后第4天開始進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn),電針組大鼠在90秒內(nèi)找到平臺逃避潛伏期、找到平臺所經(jīng)過的路程均明顯縮短,與模型組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明電針神庭、百會可以改善模型大鼠的空間學(xué)習(xí)能力。電針第9天撤去平臺后測動物在90秒內(nèi)經(jīng)過平臺所在位置的次數(shù),發(fā)現(xiàn)電針組大鼠經(jīng)過平臺所在位置的次數(shù)明顯多于模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P

4、<0.05),說明電針神庭、百會可以改善模型大鼠的空間記憶能力。
　　2 TTC染色
　　電針后第 10 天,電針組大鼠腦梗塞體積明顯小于模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明電針可以明顯縮小模型大鼠腦梗塞體積,對缺血腦組織具有神經(jīng)保護(hù)作用。
　　3 Tunel結(jié)果
　　模型組(44.67±1.3%)和電針組(22.83±1.2%)大鼠缺血腦組織中凋亡陽性細(xì)胞比率明顯高于假手術(shù)(1.15

5、±0.1%),然而電針明顯減少了模型大鼠缺血腦組織中凋亡陽性細(xì)胞比率,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明電針可以抑制大鼠缺血腦組織細(xì)胞凋亡。4 Western blot及RT-PCR觀察大鼠額葉皮質(zhì)腦缺血組織NF-κB-p65、Bax及Fas轉(zhuǎn)錄及翻譯水平
　　模型組大鼠腦缺血組織中NF-κB-p65 、Bax及Fas蛋白印跡和 mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物電泳條帶光密度較假手術(shù)組明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(n=6,P<0.05)

6、。與模型組相比,電針組大鼠額葉皮質(zhì)組織中NF-κB-p65、Bax及Fas蛋白印跡和 mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物電泳條帶光密度明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(n=6,P<0.05),說明通過抑制NF-κB信號通路介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可能是電針改善腦缺血再灌注損傷大鼠空間學(xué)習(xí)、記憶能力及其具有神經(jīng)保護(hù)作用的分子機(jī)制之一。
　　結(jié)論
　　1 電針“神庭”、“百會”可以改善局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠的認(rèn)知功能；
　　2 電針“神庭