基于CREB介導的信號通路探討電針“神庭”、“百會”對腦缺血后認知障礙治療機制.pdf

1、目的：通過大腦中動脈阻塞（MCAO）法建立局灶性腦缺血再灌注的認知障礙大鼠模型，采用電針“神庭”、“百會”，觀察其作用療效，同時進行動物認知行為學的評估及利用分子生物學技術，初步探究 CREB介導的相關信號通路與電針“神庭”、“百會”之間的關聯(lián)性，探討電針“神庭”、“百會”改善認知障礙的作用機制。
　　方法：根據(jù)預實驗，將60只健康雄性 SD大鼠隨機分為假手術組（16只）、模型組（22只）和電針組（22只）。通過大腦中動脈線栓法（

2、MCAO）建立局灶性腦缺血再灌注的認知障礙模型，電針“神庭”、“百會”進行干預，每天一次，每次30min，共10天，每天電針結束后采用 Longe法進行動物神經(jīng)功能學評分，Morris水迷宮評估模型大鼠空間學習、記憶能力；TTC染色觀察電針對模型大鼠腦梗塞體積的影響；免疫組織化學法檢測腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū) CREB、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達水平及 RT-PCR技術檢測 CREB、NGF、c-fos基因表達水平。

3、　　結果：
　　1.大鼠神經(jīng)行為學評分發(fā)現(xiàn)：假手術組未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀。從造模后第3天開始電針組大鼠評分開始下降，模型組與電針組相比較，差異具有統(tǒng)計學意義；電針后第4天開始進行水迷宮實驗，電針組大鼠在90秒內(nèi)找到平臺逃避潛伏期明顯縮短，與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學意義，說明電針“神庭”、“百會”可以改善模型大鼠的空間學習能力。電針治療的第9天，撤去平臺后測動物在90秒內(nèi)經(jīng)過平臺所在位置的次數(shù)，結果顯示電針組大鼠經(jīng)過平臺所在位置

4、的次數(shù)明顯多于模型組，差異具有統(tǒng)計學意義，說明電針“神庭”、“百會”可以改善模型大鼠的空間記憶能力；
　　2.TTC染色結果顯示：電針后第10天，大鼠腦梗塞體積電針組明顯小于模型組，差異具有統(tǒng)計學意義，說明電針可以明顯縮小模型大鼠腦梗塞體積，對缺血腦組織具有神經(jīng)保護作用；
　　3.免疫組織化學法檢測腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū)CREB、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達水平結果顯示：與假手術組相比，模型組大鼠海馬區(qū)CREB、

5、p-CREB、NGF、c-fos蛋白表達明顯減少，差異具有統(tǒng)計學意義；與模型組相比，電針組大鼠海馬區(qū)CREB、p-CREB、NGF、c-fos較模型組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義；
　　4.RT-PCR結果顯示：與假手術組相比，模型組大鼠海馬區(qū)CREB、NGF及c-fos mRNA表達明顯減少，差異具有統(tǒng)計學意義。同模型組相比，電針組大鼠海馬區(qū)組織中CREB、NGF及c-fos mRNA表達明顯增加，差異具有統(tǒng)計學意義。