6-去甲基Toxoflavin糖苷的合成及作為靶向抗腫瘤前藥的研究.pdf

1、基于腫瘤細胞產(chǎn)生的特異抗原，靶向藥物治療癌癥已經(jīng)成為人們關(guān)注的治療策略，近年來大量的研究將抗腫瘤抗體和化療藥物或天然細胞毒性化合物偶連形成靶向藥物，但是這類靶向藥物在臨床上卻未取得成功。原因在于：首先這類靶向藥物只有很低的生物利用度，其次腫瘤組織中的一些惡性細胞不表達抗原，使這類靶向藥物不能殺傷這些惡性細胞。抗體介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療策略被設(shè)計用于解決靶向藥物的上述兩種缺點?？贵w介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療策略采用的是二步

2、系統(tǒng)，首先向體內(nèi)注入單抗-酶偶聯(lián)物(Antibody-DirectedEnzyme)，單抗-酶偶聯(lián)物將與腫瘤細胞表面抗原發(fā)生特異性結(jié)和并積累在腫瘤細胞的表面。此時向機體注入無細胞毒性或低細胞毒性的前藥，前藥在腫瘤細胞的表面被酶水解釋放出高活性的抗腫瘤藥物殺傷腫瘤細胞，達到靶向治療的目的。目前關(guān)于抗體介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療策略的研究國內(nèi)還未見報道。 Toxoflavin是一種具有抗菌活性的天然化合物，近年來的研究顯示，T

3、oxoflavin及其類似物是一種新型的抗癌劑。但是Toxoflavin及其類似物作為抗癌藥物在臨床上的應(yīng)用還有很大的限制，原因在于Toxoflavin及其類似物具有高毒性和水溶性差的缺點，而糖基化通?？梢栽黾踊衔锏乃苄圆⒛軌蚋淖兓衔锏幕钚?。為了達到提高Toxoflavin及其類似物的水溶性和靶向治療癌癥的目的，本文合成了八種6-去甲基Toxoflavin糖苷作為抗體介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療策略的潛在前藥，以此為研究對象，

4、展開了酶學(xué)和體外抗腫瘤活性研究，篩選出適合于抗體介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療系統(tǒng)的前藥，為應(yīng)用6-去甲基Toxoflavin糖苷靶向治療癌癥奠定基礎(chǔ)。 本論文的主要結(jié)果如下：1.合成了八種6-去甲基Toxoflavin糖苷并命名為GDT、GXT、GYST、GYET、LYST、LYET、LDT、LXT作為抗體介導(dǎo)的酶-前藥(ADEPT)治療系統(tǒng)中的潛在前藥。本文首先利用Koenigers-Knorr方法和相轉(zhuǎn)移催化方法合成了八

5、種含醛糖苷。然后利用合成的醛苷與6-(1-甲基肼)嘧啶-2、4-二酮在醋酸下反應(yīng)形成亞胺，并加入亞硝酸鈉環(huán)化。合成了6-去甲基Toxoflavin糖苷和6-去甲基Toxoflavin糖苷的4-氧類似物，利用連二亞硫酸鈉將6-去甲基Toxoflavin糖苷的4-氧類似物還原成6-去甲基Toxoflavin糖苷。最后用甲醇鈉脫除保護基得到八種糖苷。使用HPLC鑒定，八種6-去甲基Toxoflavin糖苷純度良好，可以進行進一步研究，并用NM

6、R、IR、紫外鑒定了合成的八種6-去甲基Toxoflavin糖苷結(jié)構(gòu)。 2.GDT、GXT、GYST、GYET、LYST、LYET、LDT、LXT八種6-去甲基Toxoflavin糖苷的β-葡萄糖苷酶水解結(jié)果顯示只有GDT、GXT兩種糖苷能夠被β-葡萄糖苷酶水解，再次證明葡萄糖苷酶作用的立體專一性。比較四種含有葡萄糖的6-去甲基Toxoflavin糖苷GDT、GXT、GYST、GYET，GDT和GXT的結(jié)構(gòu)相類似，甙元含有苯環(huán)結(jié)

7、構(gòu)；GYST和GYET結(jié)構(gòu)類似，甙元含有鏈狀結(jié)構(gòu)。這四種6-去甲基ToxoflavinGDT和GXT能夠被β-葡萄糖苷酶水解，含有鏈狀結(jié)構(gòu)的GYST和GYET不能被β-葡萄糖苷酶水解，表明β-葡萄糖苷酶的作用不僅僅與糖苷中含有的糖的類型有關(guān)還與甙元的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同時比較GDT、GXT兩種6-去甲基Toxoflavin糖苷，二者都能夠被β-葡萄糖苷酶水解，但GDT具有更快的水解速度，表明苯環(huán)上是否含有取代基團對β-葡萄糖苷酶水解糖苷的速