不同皮膚擴(kuò)張方式對皮瓣組織結(jié)構(gòu)及回縮率的影響.pdf

1、目的：通過動物實驗研究反復(fù)快速擴(kuò)張、快速擴(kuò)張和常規(guī)擴(kuò)張對皮膚回縮率以及組織結(jié)構(gòu)的影響，以探討適合于臨床的最佳的皮膚擴(kuò)張方式。 材料與方法： 1.實驗動物：62只雄性新西蘭大白兔，6月齡，體重2～3Kg，由河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供。 2.動物分組： 隨機(jī)將動物分為5大組：反復(fù)快速擴(kuò)張組(A組)、快速擴(kuò)張組(B組)、常規(guī)擴(kuò)張組(C組)、植入不擴(kuò)組(D組)和正常對照組(E組)；A組、B組每組20只動物，按標(biāo)

2、本采集時間又分別分為5組：A1、B1，A2、B2，A3、B3，A4、B4，A6、B6；分別為在擴(kuò)張完成后維持1周，2周，3周，4周，6周取標(biāo)本，每組4只動物；C組16只動物，分為4組：C1、C2、C3、C4，分別為在擴(kuò)張完成后維持1周，2周，3周，4周取標(biāo)本，每組4只動物；D組5只動物，分為5組：D1、D2、D3、D4、D6，分別為植入擴(kuò)張器后不擴(kuò)張維持1周，2周，3周，4周，6周取標(biāo)本，每組1只動物；E組1只動物，為不植入擴(kuò)張器的正常

3、對照組。 3.模型制備： 實驗動物稱重，2.5 g/L戊巴比妥鈉靜脈麻醉(25mg/Kg)。自兩耳根后緣連線間橫行切開皮膚；在頭部皮膚與顱骨骨膜之間用血管鉗鈍性分離，植入50ml擴(kuò)張器。自術(shù)后第3天開始擴(kuò)張皮膚。A組：每天擴(kuò)張1次，每天最終注水5ml，擴(kuò)張過程：注無菌生理鹽水20ml，維持30min，然后抽出20ml，間隔3小時，再注水20ml，照此反復(fù)3次，最后一次抽出15ml，以后每天重復(fù)以上的方法，10天完成注水；

4、B組：每天擴(kuò)張1次，每次注無菌生理鹽水5ml，10天完成注水；C組：每3天擴(kuò)張1次，每次注無菌生理鹽水5ml，共注水10次，28天完成注水；D組：植入擴(kuò)張器后不擴(kuò)張；E組：不植入擴(kuò)張器。 4.標(biāo)本采集與處理： 4．1測定回縮率標(biāo)本的采集 各組于標(biāo)本采集時間點，動物全麻后于取材前剪掉動物頭皮毛發(fā)，以白紙覆蓋在動物擴(kuò)張皮膚上，緊密覆蓋會產(chǎn)生數(shù)個皺折，壓緊皺折固定好白紙沿擴(kuò)張范圍同步剪下擴(kuò)張皮膚與紙樣，展平覆蓋擴(kuò)張皮膚

5、的紙樣，用分格法測量紙樣面積計為S<,0>皺折痕跡形似數(shù)個三角形，皺折三角形總面積計為S<,1>，將剪下的擴(kuò)張皮膚形狀描記在白紙上，用分格法測量出面積計為S<,2>，擴(kuò)張后面積計為S<,3>。 4．2光鏡與電鏡標(biāo)本采集與處理 各組到取材時間后，全麻下在擴(kuò)張皮瓣中央先切取1×1cm大小的組織塊作為標(biāo)本，后于此標(biāo)本上切取1×0.1cm大小的組織塊，將其切割成0.1×0.1cm大小的組織塊，前者投入10％甲醛液中固定，常規(guī)脫水

6、、透明、浸蠟、包埋，制成4μm連續(xù)切片；后者置入4％戊二醛和1％鋨酸固定，梯度酒精脫水，鈾鋁雙重染色，環(huán)氧樹脂618包埋，制成超薄切片。 5觀察指標(biāo)： 5．1大體標(biāo)本肉眼觀察 5．2回縮率的測定 擴(kuò)張面積：S<,3>=S<,0>-S<,1>，回縮率：K=(S<,3>-S<,2>)/S<,3>×100％ 5.3光鏡觀察 5．4電鏡觀察 6 統(tǒng)計學(xué)方法： 回縮率用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表

7、示，經(jīng)SPSS 11.5統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，P<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.大體觀察： 在擴(kuò)張過程中，各實驗組動物擴(kuò)張皮瓣均未出現(xiàn)感染、血運(yùn)異常及皮膚壞死等并發(fā)癥。 2.光鏡觀察： A、C兩組在不同維持期的組織學(xué)表現(xiàn)較接近，均表現(xiàn)為表皮層厚度增加，表皮細(xì)胞核大而圓；膠原纖維斷裂較少，在維持期2周時，斷裂的膠原纖維漸恢復(fù)并呈條索狀、整齊排列；至維持期3周時，已基本接近正常，維持期4周

8、時即基本恢復(fù)至正常。而B組在維持期4周時也可觀察到基本恢復(fù)，但在維持期1、2周可觀察到大量的膠原纖維斷裂，且表皮層厚度增加不明顯，表皮細(xì)胞核相對較小，排列不齊。植入不擴(kuò)組組織學(xué)表現(xiàn)近似于正常對照組。 3.電鏡觀察： 在維持1周時，A、B、C組基底細(xì)胞胞質(zhì)可見少量的表面張力細(xì)絲，基底膜部分?jǐn)嗔眩霕蛄?shù)量很少；成纖維細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，明顯擴(kuò)張，線粒體數(shù)量明顯增加，A組的細(xì)胞功能較B、C組活躍。到達(dá)維持4周時，A、

9、B、C 組基底細(xì)胞立方狀，胞質(zhì)內(nèi)可見大量的表面張力細(xì)絲，基底膜基本恢復(fù)正常，半橋粒數(shù)量少；成纖維細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器數(shù)量明顯減少，線粒體大部分嵴或膜融合，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張。隨著維持時間的延長，細(xì)胞功能活躍程度降低，A、C組較B組接近正常。 4.回縮率的變化 A、B、C、D組回縮率均高于E組(P<0.05)。 A、B、C組回縮率隨時間延長均呈下降趨勢。 在維持1、2、3、4周，A、B、C組比較，A、C

10、組與B組比較均有顯著性差異(P<0.05)；在維持1、2周，A組與C組比較有顯著性差異(P<0.05)；在維持3、4周，A組與C組比較無明顯差異(P>0.05)；在維持6周，A組與B組比較無顯著性差異(P>0.05)，維持6周的A、B組與維持4周的C組比較均無顯著性差異(P>0.051。 結(jié)論：1.不同擴(kuò)張方式擴(kuò)張后，對皮瓣回縮率及皮瓣質(zhì)量是有影響的。 2.反復(fù)快速擴(kuò)張方式皮瓣回縮率小于快速擴(kuò)張，皮瓣質(zhì)量好于快速擴(kuò)張。