Flow-through和Flow-end不同供血方式對大鼠帶蒂穿支皮瓣成活的影響.pdf

1、目的:
　　Flow-through和Flow-end不同供血方式對帶蒂皮瓣成活面積實(shí)驗(yàn)性研究，并初步探討其作用機(jī)制，為指導(dǎo)臨床上穿支皮瓣手術(shù)提供新的思路和方法。
　　方法:
　　1.實(shí)驗(yàn)分組及動物模型制作:
　　健康成年SD大鼠45只，體重250～300g，本實(shí)驗(yàn)分為兩部分。第一部分，5只大鼠明膠氧化鉛造影，獲得大鼠全身造影圖像和股動脈及其分支腹壁淺動脈走形圖，設(shè)計(jì)下腹部三穿支體（腹壁淺動脈+同側(cè)旋髂深動脈+對

2、側(cè)旋髂深動脈）皮瓣。第二部分，40只大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組、對照組（每組各20只）。在大鼠下腹背部制備以腹壁淺動脈為蒂，大小為3×11cm的島狀皮瓣，實(shí)驗(yàn)組（Flow-through）不做處理;對照組(Flow-end)結(jié)扎股動脈分出腹壁淺動脈后的遠(yuǎn)端。
　　2.皮瓣大體觀察及成活率的統(tǒng)計(jì):
　　術(shù)后1-5天，肉眼觀察皮瓣成活狀況，包括皮瓣顏色、組織彈性、質(zhì)地，壞死面積等，并記錄。術(shù)后第7天麻醉下拍攝高質(zhì)量圖片，導(dǎo)入M2 Ima

3、ge AnalysisSystem軟件計(jì)算皮瓣成活面積百分比。
　　3.背側(cè)中線區(qū)（ChokeⅡ區(qū)）激光多普勒皮膚血流灌注量
　　術(shù)后第5天對照組、實(shí)驗(yàn)組大鼠麻醉后，在室溫24℃左右用激光多普勒依次測量背側(cè)中線區(qū)（ChokeⅡ區(qū)）術(shù)后2小時(shí)、3天、5天的皮膚血流灌注量。
　　4.皮瓣明膠-氧化鉛造影:
　　術(shù)后第5天取對照組、實(shí)驗(yàn)組各8只，采用注射器將配置好的明膠-氧化鉛混合物注入頸動脈，經(jīng)X線對皮瓣進(jìn)行血管造影

4、。
　　5.背側(cè)中線區(qū)（ChokeⅡ區(qū)）組織學(xué)檢測:
　　術(shù)后第5天實(shí)驗(yàn)組、對照組各7只，取跨區(qū)穿支皮瓣chokeⅡ區(qū)中央?yún)^(qū)域皮瓣組織，進(jìn)行HE染色，顯微鏡下測微血管密度(MVD)。
　　6.背側(cè)中線區(qū)（ChokeⅡ區(qū)）Western blot觀測VEGF表達(dá):
　　術(shù)后第5天取chokeⅡ區(qū)中央組織Western blot法檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)情況。通過對圖片灰度值進(jìn)行測量，作為評價(jià)血管內(nèi)皮生長

5、因子表達(dá)的指標(biāo)。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠軀干動脈造影:
　　根據(jù)5只大鼠的造影顯示，可以從大鼠左側(cè)下腹部到背側(cè)設(shè)計(jì)一環(huán)形的皮瓣，包括三個(gè)血管體區(qū)（解剖區(qū)、動力區(qū)、潛在區(qū)），即左側(cè)的腹壁淺動脈區(qū)和左側(cè)的旋髂深動脈區(qū)加上右側(cè)背部的旋髂深動脈區(qū)。
　　2.皮瓣大體觀察及成活率的統(tǒng)計(jì):
　　術(shù)后第1天，兩組皮瓣均呈現(xiàn)不同程度的腫脹，皮瓣遠(yuǎn)端呈暗紫色。術(shù)后第3天，皮瓣遠(yuǎn)端呈現(xiàn)局部灶狀、小片狀壞死。術(shù)后5d兩組皮瓣遠(yuǎn)

6、端壞死部分均趨于融合，有不同面積痂殼出現(xiàn)，壞死區(qū)穩(wěn)定，界線清晰。兩組潛在區(qū)出現(xiàn)不同程度的壞死面積，實(shí)驗(yàn)組壞死界限位于背側(cè)中線區(qū)（chokeⅡ區(qū)）以遠(yuǎn)，對照組壞死界限接近于背側(cè)中線區(qū)（chokeⅡ區(qū)）。根據(jù)公式:皮瓣成活率=皮瓣成活表面積/皮瓣總表面積×100％，計(jì)算各組皮瓣成活率。對照組和實(shí)驗(yàn)組皮瓣壞死率分mean(standard deviation)（97.8％±3.5％）和（80.8％±10.2％），實(shí)驗(yàn)組皮瓣的成活面積顯著高于對

7、照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)。
　　3.背側(cè)中線區(qū)(ChokeⅡ區(qū))激光多普勒皮膚血流灌注量
　　實(shí)驗(yàn)組和對照組在背側(cè)中線區(qū)（ChokeⅡ區(qū)）的激光多普勒測量的皮膚血流灌注量分別為;術(shù)后2小時(shí)，7.53(0.27)和5.39(0.86) PU，術(shù)后3天，7.44(0.79)和5.88(0.34) PU,術(shù)后5天，8.64(0.14)和5.95(0.14) PU，所有的P＜0.001。
　　4.皮瓣明膠氧化鉛

8、造影:
　　明膠-氧化鉛灌注造影顯示實(shí)驗(yàn)組血管體血管形態(tài)較清，chokeⅡ區(qū)真性吻合數(shù)較對照組明顯增多。
　　5.ChokeⅡ區(qū)組織學(xué)檢測:
　　在chokeⅡ區(qū)，實(shí)驗(yàn)組較對照組織輕度水腫，炎性細(xì)胞浸潤較輕，肉芽組織較少，皮膚附屬器存在，出現(xiàn)大量的新生血管。實(shí)驗(yàn)組和對照組chokeⅡ區(qū)微血管計(jì)數(shù)分別為303(19)個(gè)/mm2和207(41)個(gè)/mm2，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　6.ChokeⅡ區(qū)V