SOX7和SOX17基因啟動(dòng)子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預(yù)后價(jià)值研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文SOX7和SOX17基因啟動(dòng)子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預(yù)后價(jià)值研宄院系：華山醫(yī)院血液科研究生：樊榮導(dǎo)師：王小欽教授導(dǎo)師組成員：陳波斌副教授許小平教授林果為教授復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院二零一二年四月復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要SOX7和SOX17基因啟動(dòng)子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預(yù)后價(jià)值研宄中文摘要第一部分S0X7和S0X17基因啟動(dòng)子異常甲基化抑制白血病細(xì)胞株中S0X7和S0X17基因表達(dá)目的：

2、在急性髓系白血病細(xì)胞株THP1和骨髓增生異常綜合征（MDS)轉(zhuǎn)白細(xì)胞株SKM1中，探討去甲基化藥物5氮雜2脫氧胞苷（DAC)處理對S0X7和SOX17基因表達(dá)和細(xì)胞增殖的影響；檢測S0X7和SOX17基因在細(xì)胞株中甲基化狀態(tài)，同時(shí)對甲基化PCR(MSP)技術(shù)的正確性進(jìn)行驗(yàn)證。方法：使用2、4和8nmolLDAC處理細(xì)胞株（THP1和SKM1)，在24h、48h和96h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察SOX7和S0X17基因表達(dá)變化。使用CCK8法檢測4|

3、imolLDAC藥物濃度對細(xì)胞增殖的影響。采用MSP的方法檢測細(xì)胞株S0X7和S0X17DNA甲基化狀態(tài)，并用亞硫酸鹽測序驗(yàn)證MSP技術(shù)的結(jié)果。結(jié)果：SOX7和S0X17基因在THP1和SKM1細(xì)胞株中均有表達(dá)，使用DAC處理后S0X7和S0X17基因mRNA表達(dá)均被上調(diào)（P0.05)，并有濃度梯度和時(shí)間梯度效應(yīng)，且THPI細(xì)胞株S0X7和S0X17基因表達(dá)上調(diào)幅度較SKM1高。4nmolLDAC處理細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖減慢（P0.05

4、)，THP1較SKM1對藥物反應(yīng)敏感。MSP結(jié)果發(fā)現(xiàn)，S0X7和S0X17基因甲基化DNA存在于THP1和SKM1細(xì)胞株中，亞硫酸鹽測序驗(yàn)證結(jié)果與MSP結(jié)果一致。結(jié)論：THP1和SKM1細(xì)胞株中存在S0X7和SOX17基因的異常甲基化，基因表達(dá)水平在DAC處理后上調(diào)。亞硫酸鹽測驗(yàn)驗(yàn)證了MSP試驗(yàn)的正確性，表明可以使用該方法進(jìn)行大批量臨床標(biāo)本S0X7和S0X17基因甲基化檢測。關(guān)鍵詞：THP1細(xì)胞株；SKM1細(xì)胞株；S0X7基因；S0X1