骨髓增生異常綜合征患者p15與SOCS-1基因異常甲基化的臨床研究.pdf

1、目的:
　　探討MDS患者細(xì)胞周期調(diào)控因子p15及SOCS-1基因啟動子區(qū)域異常甲基化的發(fā)生情況及臨床意義。
　　方法:
　　采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MS-PCR)、熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測70例MDS患者和40例正常人骨髓p15和SOCS-1基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)及其mRNA表達(dá)水平，并分析與MDS患者各項臨床資料的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　?。ㄒ唬㏄15在MDS中的表達(dá)及臨床意義

2、　　1.70例MDS患者p15基因啟動子區(qū)異常甲基化發(fā)生率明顯高于對照組(57.14％ vs0％)，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。
　　2.在MDS的WHO分型中，RAEB1和RAEB2患者p15啟動區(qū)異常甲基化發(fā)生率明顯高于其它亞型患者(67.74％ vs29.41％，P=0.011)。
　　3.在根據(jù)IPSS分組的60例患者中，p15啟動子區(qū)域發(fā)生異常甲基化發(fā)生率分別是低危組0％(0/3)，中危-1組47.2

3、2％(17/36)，中危-2組76.47％(13/17)，高危組100％(4/4)，各分組甲基化發(fā)生率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.008)。
　　4.在55例已做FISH檢測的MDS患者中，39例無異?；蛑挥?Y、-5/5q-、20q-其中一種染色體異常的患者有19例(28.72％)發(fā)生p15異常甲基化，8例只有+8異常的患者中有5例(62.5％)發(fā)生p15異常甲基化，8例有-7/7q-或一種以上染色體異常的患者有7例(87.5％)

4、發(fā)生p15異常甲基化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.159)。在做了染色體培養(yǎng)的46例MDS患者中，染色體核型異常的MDS患者p15異常甲基化發(fā)生率明顯高于染色體核型正常的患者(80.95％ vs48％，P=0.032)。
　　5.70例MDS患者骨髓細(xì)胞中p15mRNA的相對表達(dá)量明顯低于正常人(1.41±1.03 vs2.63±1.67，P＜0.001)。P15啟動子區(qū)發(fā)生異常甲基化的MDS患者骨髓細(xì)胞中其mRNA相對表達(dá)量較未發(fā)

5、生異常甲基化的MDS患者明顯降低(1.19±1.02 vs1.72±0.99，P=0.037)。
　　（二）SOCS-1在MDS中的表達(dá)及臨床意義
　　1.70例MDS患者SOCS-1基因啟動子區(qū)異常甲基化發(fā)生率明顯高于正常人對照組為(25.71％ vs0％)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。
　　2.在MDS的WHO分型中，SOCS-1啟動子區(qū)域發(fā)生異常甲基化發(fā)生率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003)，并與骨髓原始

6、細(xì)胞比例呈正相關(guān)(r=0.528，P＜0.001)。
　　3.在根據(jù)IPSS分組的60例患者中，SOCS-1啟動子區(qū)域發(fā)生異常甲基化發(fā)生率分別是低危組0％(0/3)，中危-1組11.11％(4/36)，中危-2組47.06％(8/17)，高危組75％(3/4)，各分組甲基化發(fā)生率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)。
　　4.無異?；蛑挥?Y、-5/5q-、20q-其中一種染色體異常的患者有8例(20.51％)發(fā)生SOCS-1

7、異常甲基化，8例只有+8異常的患者中有1例(12.5％)發(fā)生SOCS-1異常甲基化，8例有-7/7q-或一種以上染色體異常的患者有4例(50％)發(fā)生SOCS-1異常甲基化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.205)。染色體核型異常的MDS患者SOCS-1異常甲基化發(fā)生率明顯高于染色體核型正常的患者(47.62％vs16％，P=0.027)。
　　5.MDS患者SOCS-1 mRNA的相對表達(dá)量明顯低于正常人(1.00±0.72vs2.55

8、±2.47，P＜0.001)。SOCS-1啟動子區(qū)發(fā)生異常甲基化的MDS患者SOCS-1mRNA表達(dá)量較未發(fā)生異常甲基化的MDS患者明顯降低(0.76±0.72 vs1.16±0.68)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.042)。
　?。ㄈ┩ㄟ^Spearman相關(guān)分析，結(jié)果表明p15基因mRNA表達(dá)水平和SOCS-1基因mRNA表達(dá)水平成正相關(guān)(r=0.467，P＜0.001)。13例同時存在p15與SOCS-1兩種基因異常甲基化的患

9、者，其在IPSS分組中的發(fā)生率高危組＞中危-1＞中危-2(75％＞41.18％＞8.33％)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。
　?。ㄋ模?例已行地西他濱化療的MDS患者，p15和SOCS-1基因mRNA相對表達(dá)水平均較治療前有所增多。
　　結(jié)論:
　　1.MDS患者骨髓細(xì)胞中的p15和SOCS-1基因啟動子區(qū)的異常甲基化的發(fā)生率較正常人高。
　　2.高危MDS患者的p15和SOCS-1基因啟動子區(qū)發(fā)生甲基化